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人抗嗜中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）ELISA試劑盒說明書

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公司名稱上海美旋生物科技有限公司
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更新時間2015/6/26 12:22:46
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人抗嗜中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）ELISA試劑盒說明書 ELISA試劑盒

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人抗嗜中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）ELISA試劑盒說明書由上海美旋生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)，上海美旋生物*經(jīng)營各種類ELISA試劑盒及抗體、生化試劑、耗材等生物試劑產(chǎn)品。秉承“高品質(zhì)、低價格、快發(fā)貨”的服務(wù)理念，誠信經(jīng)營，價格實惠，服務(wù)周到，質(zhì)量有保證。歡迎新老客戶！

人抗嗜中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）ELISA試劑盒說明書產(chǎn)品信息

人抗嗜中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)ELISA試劑盒說明書操作方法：

一、雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3. 加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

人抗嗜中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)ELISA試劑盒說明書

二、間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.’zui后一遍用DDW洗滌。

其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

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