貨號：WT-E5288【犬正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】ELISA基礎(chǔ)知識及常見問題處理

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）

?ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種酶免疫測定。在檢驗中主要通過抗原抗體于固相或液相載體中反應檢測體液中的抗體或抗原性物質(zhì)。通過辣根過氧化物酶（HRP)與底物液TBM的反應指示出所檢測物質(zhì)的有無。

?1　抗原：抗原是能在機體中引起特異性免疫應答的物質(zhì)。

?2　抗體：抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。

?　　 機體被微生物感染后，先產(chǎn)生IgM抗體，然后產(chǎn)生IgG抗體。經(jīng)過一段時間，IgM抗體量逐漸減少而消失，而IgG抗體可*存在，在疾病*后可持續(xù)數(shù)年之久。

【犬正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】ELISA檢測方法

?夾心法:

?雙抗原（抗體）夾心法是檢測抗原zui常用的方法，其檢測方法：

?雙抗原夾心：

?    固相(包被)抗原Ag + 樣品(抗體Ab) + 酶標抗原Ag*  → Ag-Ab-Ag* + 底物(TMB)→顯色

?雙抗體夾心：

?    固相(包被)抗體Ab + 樣品(抗原Ag) + 酶標抗體Ab *  → Ab-Ag-Ab* + 底物(TMB)→顯色

【犬正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】間接法

?間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標記的抗抗體（抗*抗體）以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。

?其檢測方法：

?     固相(包被)抗原Ag + 樣品(抗體Ab) + 酶標二抗Ab*  → Ag-Ab-抗Ab* + 底物(TMB)→顯色

【犬正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒檢測方法】?競爭法

?其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結(jié)合。標本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標抗體愈少，因此陽性反應呈色淺于陰性反應：

?固相(包被)抗原Ag + 樣品(抗體Ab) + 酶標抗體Ab*  → Ag-Ab + 底物(TMB)→不顯色(+)

?固相(包被)抗原Ag + 樣品(無抗體Ab) + 酶標抗體Ab*  → Ag-Ab* + 底物(TMB)→顯色(-)

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