供應商：江蘇科晶生物科技有限公司

江蘇科晶生物ELISA試劑盒*優(yōu)勢:

1、采用全進口原料和抗體：高效、靈敏、特異，嚴格引進技術(shù)標準進行批量生產(chǎn)。

2、*的優(yōu)化方案：重復性高，可靠性。

3、技術(shù)服務:專業(yè)，及時，耐心。

4、現(xiàn)貨供應:江浙滬隔天到貨，外地3-5天到貨。

大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 技術(shù)原理：

(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。

(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結(jié)合在固相載體上。

(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。

大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 操作步驟:

1、包被過程(注意設置空白對照,陰性對照):

將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?

2、封閉酶標反應孔:

5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.

洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干

洗滌次數(shù)3次

3、加入待檢測樣品(建立合適的濃度梯度):

檢測時一般采用1:50-1:400的稀釋度,應采用較大稀釋體積進行,一般保證樣品吸取量>20μl.

將稀釋好的樣品加入酶標反應孔中,每樣品至少加雙孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.

4、加入酶標抗體:

酶標抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前.

5、加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):

*TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統(tǒng)次之.

底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.

6、終止反應:

每孔加入終止液50μl終止反應,于20min內(nèi)測定實驗結(jié)果.

7、結(jié)果判斷:

OPD顯色后采用492nm波長,TMB反應產(chǎn)物檢測需要450nm波長.檢測時一定要首*行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測定標本孔的吸收值與一組陰性標本測定孔平均值的比值(P/N)表示,當P/N大于2時作為抗體的效價.(數(shù)值的大小依具體檢測要求而定.)

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