柱式植物葉綠體DNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
柱式植物葉綠體DNAout | 15次 | 1990元 |
|
本試劑盒是結(jié)合植物葉綠體純化試劑盒和柱式植物DNA抽提試劑盒而推出的新興產(chǎn)品,專門用于植物葉綠體DNA的快速提取。它具有下列特點(diǎn):
1. 純度高,不含污染和抑制劑,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、 multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsalite analysis等各種后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
2. 產(chǎn)率一般在3-30 ug/100 mg樣品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段長(zhǎng)度一般在40-50 Kb左右。
3. 本產(chǎn)品足夠15次提取,每次可處理30g葉片。
4. 已經(jīng)成功用于菠菜,大豆,萵筍,白菜,煙草和甜菜等植物,還可用于更多植物(可能需要優(yōu)化條件)。
5. 不會(huì)發(fā)生離心柱堵塞現(xiàn)象。
6. 價(jià)廉物美,與國(guó)外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價(jià)格便宜。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
IPTG Solution(IPTG溶液),20%
Kinase Buffer I,5X
Kinase Buffer II,5X
Kinase Buffer III,5X
Kinase Buffer IV,5X
Kinase Buffer V,5X
Kinase Buffer VI,5X
Kinase Stop Buffer,5X
Kinase Storage Buffer