實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：血磷濃度測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測(cè)方法：微量法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6794
產(chǎn)品分類：離子系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 血磷主要指血中的無(wú)機(jī)磷，以無(wú)機(jī)磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關(guān)系密切，在以mg/dL表示時(shí)，二者的乘積(［Ca］×［P］)為30～40。當(dāng)(［Ca］×［P］)>40，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織；若(［Ca］×［P］)<35則妨礙骨的鈣化，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對(duì)穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對(duì)平衡。上述平衡受到D3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié)。 測(cè)定原理： 去除血清中有機(jī)磷后，無(wú)機(jī)磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸，被還原后呈藍(lán)色，在620nm有光吸收；通過(guò)測(cè)定620 nm吸光度，計(jì)算血液中磷含量。 自備儀器和用品： 離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
50次 凝膠法miRNA分離試劑盒
2 ug pPyCAGIP pPyCAGIP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
馬尿酸鈉 250g
5mg 抑制劑 Pepstatin A 4℃保存
50T 人免疫缺陷病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
5 mg Carboxy-PTIO （一氧化氮清除劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH4.0 Citrate Buffer,0.5M,pH4.0 常溫保存
1袋 顯影粉 Developing Solution,Powder 室溫避光保存
2 ug phRL-TK phRL-TK 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
溶血瓊脂基礎(chǔ) 250g
2 ug pGCsi/H1/Neo GFP-NON pGCsi/H1/Neo GFP-NON 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
血磷濃度測(cè)試盒微量法phospho-P53(Ser315) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1mlWASF1/WAVE 1 WAVE1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
IKKα(Phospho-Thr23) 磷酸化KB抑制蛋白激α抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
DUSP22/JSP1 雙特異性磷酸22抗體 規(guī)格: 0.2mlAKAP6 蛋白激A錨定蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml
Flightless 1 凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體 規(guī)格: 0.2mlDEPDC1 細(xì)胞周期調(diào)控蛋白SDP35抗體 規(guī)格: 0.2ml
HSP22 熱休克蛋白-22抗體 規(guī)格: 0.1mlMYL7 肌球蛋白輕鏈7抗體 規(guī)格: 0.2ml
MAP7D1/RPRC1 /脯富含卷曲蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlFBXO33 F-box蛋白相關(guān)蛋白33抗體 規(guī)格: 0.2ml
Runx3 Runx3抗體 規(guī)格: 0.1mlARHGAP32 Rho GTP激活蛋白32抗體 規(guī)格: 0.2ml
MEF2C 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 規(guī)格: 0.1mlRGC32 補(bǔ)體應(yīng)答基因32抗體 規(guī)格: 0.2ml
c-Maf 原基因cMAF抗體 規(guī)格: 0.1mlCaspase 14 半胱胺酸蛋白蛋白14抗體 規(guī)格: 0.2ml
BK channel BK通道蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlSarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白/α-SCA抗體 0.1ml
ZCWCC1 ZCWCC1抗體 規(guī)格: 0.1mlCaspase 8 半胱蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1ml
HCF2/Heparin Cofactor II 肝素輔助因子II抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-ATG4D(Ser15) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體 規(guī)格: 0.1ml
