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NEB10-beta電轉感受態(tài)細胞

參考價 4800
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱南京沃博生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號ZC1044D
  • 所  在  地南京市
  • 廠商性質生產廠家
  • 更新時間2024/8/5 10:24:49
  • 訪問次數196
產品標簽:

菌株內切酶

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自主生化試劑品牌warbio已經入駐多家高校平臺,先后入駐南京大學,南京農業(yè)大學,東南大學,西湖大學,華南理工大學,北京師范大學,福建農林大學,北京庫巴扎,天津基理,上海至采信息采購平臺等公司秉持誠信經營,為科研工作者提供更好的產品。專業(yè)代理銷售國內外生命科學領域的產品以及warbio沃博生物常規(guī)生化試劑,公司長期以來與眾多國內外廠家和多家專業(yè)代理銷售公司保持密切聯系、溝通與合作,擁有穩(wěn)定、有效的產品供應渠道。公司長期以來以提供高質量的產品、實惠的價格和優(yōu)質的服務贏得客戶的好評,與多家高等院校、研究所、醫(yī)院、制藥企業(yè)等大型科研機構建立長期穩(wěn)定的合作關系。
主要代理北京莊盟生物分子試劑,Abmart艾比瑪特抗體,美國Phytoteche一級代理,美國AATBIO細胞染料,安普未來恒溫擴增試劑盒,英國TwistDx公司RPA等溫擴增試劑盒,美國GLPBIO抑制劑,Tolobio吐露港生物  ,藥物發(fā)現一站式平臺 陶術生物Topscience等國外生命科學產品試劑耗材。



生物科生物科技技術開發(fā)、技術服務、技術轉讓、技術咨詢;實驗室設備、化工原料及產品、機電設備、藥品、化妝品、包裝材料、實驗室耗材技技術開發(fā)、技術服務、技術轉讓、技術咨詢;實驗室設備、化工原料及產品、機電設備、藥品、化妝品、包裝材料、實驗室耗材
CAS ZC1044D 產品規(guī)格 50μl×20支
級別 超純、高純
大腸桿菌K12菌株背景,DH10B菌株的衍生菌株,核基因中具有l(wèi)ianmeisu抗性基因(StrR);可轉化大質粒和BACs;DNA重組缺陷(recA1)和內切酶 I缺陷(endA1)的特點有利于DNA克隆的穩(wěn)定和高純度質粒DNA的提?。粚1噬菌體有抵抗能力(fhuA2);無需添加IPTG,只加X-gal即可檢測beta半乳糖苷酶活性,用于藍白斑篩選。
NEB10-beta電轉感受態(tài)細胞 產品信息

大腸桿菌K12菌株背景,DH10B菌株的衍生菌株,核基因中具有l(wèi)ianmeisu抗性基因(StrR);可轉化大質粒和BACs;DNA重組缺陷(recA1)和內切酶 I缺陷(endA1)的特點有利于DNA克隆的穩(wěn)定和高純度質粒DNA的提取;對T1噬菌體有抵抗能力(fhuA2);無需添加IPTG,只加X-gal即可檢測beta半乳糖苷酶活性,用于藍白斑篩選。

NEB 10-beta電轉感受態(tài)細胞只能用于電擊轉化,不能用于熱激轉化。該菌株為DH10B衍生株,屬大腸桿菌K12菌株,特別適用于BAC,Cosmid等大質粒骨架的文庫構建和大質??寺』驍U增。DNA重組缺陷(recA1)和I型內切酶缺陷(endA1)的特點有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質粒 DNA的提取。該菌株具有抗T1噬菌體感染的特點,還可用于藍/白斑篩選實驗,檢測β-半乳糖苷酶的活性時,無需添加IPTG,只加X-gal即可。NEB 10-beta電轉感受態(tài)細胞經特殊工藝制作,pUC19 質粒檢測轉化效率可達1X10cfu/μg DNA。基因型為:araD139△(ara,leu)7697 fhuA lacX74 galK16 galE15 mcrA80d(lacZM15)recAl relAl endAlnupG rpsL rph spoT1△(mrrhsdRMS-mcrBC)

操作方法:

1.電極間距為 0.1cm 的電轉杯(Gene Pulser/MicroPulser" electroporation cuvettes)插入碎冰中,壓實冰面,冰中靜置5分鐘,使電轉杯充分降溫。(電轉杯重復使用方法:每次用完后,用大量的自來水沖洗干凈去掉菌液和DNA,用蒸餾水洗3遍,將其泡在75%乙醇中30分鐘,取出杯子,瀝干液體,放在超凈臺中,使乙醇充分揮發(fā),蓋上蓋子放干燥地方備用)。2.取-70℃保存的感受態(tài)細胞插入冰中,待細胞剛化凍后,加入質粒DNA或連接產物(洗脫或溶解質粒的溶液中離子不能太高,或用雙蒸水稀釋,對照pUC19可以用無菌水稀釋到10pg/μl),用手指boda管底輕輕混勻,立即插入冰中,在超凈臺中用無菌吸頭將細胞/DNA混合物快速轉移到電擊杯中,避免產生氣泡,確保細胞沉到杯底,蓋上杯蓋,空管保留待用。3.啟動電轉儀,設置電擊參數:2.4kV,200Ω,25μF(BTX ECM 630或Bio-Rad GenePulser)。用紙巾擦掉電轉杯外部的水分,將電轉杯放入電轉槽中進行電擊。完成后,將電轉杯插入冰中,加入950μl無抗生素的 SOC 或LB培養(yǎng)基,并將液體轉移到原來保留的感受態(tài)空管中,37C,150-250rpm 振蕩培養(yǎng)1小時。4.取 100-200μl左右的菌液或稀釋后的菌液,涂布于含相應抗生素的LB平板上,倒置放于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)12-18小時。


關鍵詞:培養(yǎng)箱
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