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ClearColi K12電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

參考價(jià)	￥ 4800
訂貨量	≥1盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

公司名稱南京沃博生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號ZC1042D
所在地南京市
廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間2024/8/19 14:39:52
訪問次數(shù)193

產(chǎn)品標(biāo)簽:

大腸桿菌脂多糖

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公司介紹主營產(chǎn)品

自主生化試劑品牌warbio已經(jīng)入駐多家高校平臺，先后入駐南京大學(xué)，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，東南大學(xué)，西湖大學(xué)，華南理工大學(xué)，北京師范大學(xué)，福建農(nóng)林大學(xué)，北京庫巴扎，天津基理，上海至采信息采購平臺等公司秉持誠信經(jīng)營，為科研工作者提供更好的產(chǎn)品。專業(yè)代理銷售國內(nèi)外生命科學(xué)領(lǐng)域的產(chǎn)品以及warbio沃博生物常規(guī)生化試劑，公司長期以來與眾多國內(nèi)外廠家和多家專業(yè)代理銷售公司保持密切聯(lián)系、溝通與合作，擁有穩(wěn)定、有效的產(chǎn)品供應(yīng)渠道。公司長期以來以提供高質(zhì)量的產(chǎn)品、實(shí)惠的價(jià)格和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)贏得客戶的好評，與多家高等院校、研究所、醫(yī)院、制藥企業(yè)等大型科研機(jī)構(gòu)建立長期穩(wěn)定的合作關(guān)系。
主要代理北京莊盟生物分子試劑，Abmart艾比瑪特抗體，美國Phytoteche一級代理，美國AATBIO細(xì)胞染料，安普未來恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒，英國TwistDx公司RPA等溫?cái)U(kuò)增試劑盒，美國GLPBIO抑制劑，Tolobio吐露港生物，藥物發(fā)現(xiàn)一站式平臺陶術(shù)生物Topscience等國外生命科學(xué)產(chǎn)品試劑耗材。

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產(chǎn)品簡介在線詢價(jià)

CAS	ZC1042D	產(chǎn)品規(guī)格	50μl×20支
級別	超純、高純

ClearColi K12電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品信息

ClearColi K12 電擊感受態(tài)細(xì)胞只能用于電擊轉(zhuǎn)化，不能用于熱激轉(zhuǎn)化。ClearColi K12菌株來源于K12endA-recA-菌株。在K12 endA-recA-菌株中引入突變，導(dǎo)致ClearColi K12細(xì)胞壁外層的脂多糖(LPS)被修飾:LPS的低聚糖鏈被刪除，同時(shí)LPS的兩個(gè)?；溡脖粍h除，進(jìn)而破壞了ClearColi K12大腸桿菌的內(nèi)毒素信號通路，使得從該細(xì)胞中提取的蛋白或質(zhì)粒DNA中的內(nèi)毒素含量極低，提取的無內(nèi)毒素質(zhì)粒廣泛應(yīng)用于后續(xù)的哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)化。ClearColiK12同時(shí)缺失核酸內(nèi)切酶(endA)和重組酶(recA)，提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量。ClearColiK12電擊感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1X10cfu/μg DNA?；蛐蜑? FλΔendAΔ recAfrr181 msbA52Δ gutQΔ kdsDΔ lpxL Δ lpxMΔpagPlpxP A eptA

操作方法:1.0.1cm 電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5min,待其瀝干水分,正置5min,使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5min充分降溫。2.取 -70℃保存的電擊感受態(tài)細(xì)胞插入冰中5min,待其融化,加入目的DNA(質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物)并用手boda離心管底輕輕混勻,避免產(chǎn)生氣泡,立即插入冰中。A.測定轉(zhuǎn)化效率使用1μl 0.1ng/μl 的對照質(zhì)粒pUC19;B.對于連接產(chǎn)物,請用乙醇沉淀DNA后加入適量TE緩沖液(10mM Tris-HCl,pH7.5;1mM

EDTA)重懸,DNA濃度不超過100ng/μl,體積不超過5μl/50μl感受態(tài)。3.用 200μl 槍頭將感受態(tài)-DNA混合物快速移到電擊杯中,避免產(chǎn)生氣泡,蓋上杯蓋。4.啟動電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù):C=25μF, PC=200Ω,V=1.8kV(BioRad電轉(zhuǎn)儀推薦參數(shù));或C=25μF,PC=200Ω.V=2.4kV(BTX ECM 630或Bio-Rad GenePulser電轉(zhuǎn)儀推薦參數(shù));也可按所用電轉(zhuǎn)儀推

薦的參數(shù)操作。將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,電擊完成快速插入冰中。5.2min后從冰中取出電擊杯,放室溫,加入700μl不含抗生素的無菌S.O.C.培養(yǎng)基(室溫),用1ml

槍吹吸電擊杯底部數(shù)次混勻后,轉(zhuǎn)移到50ml離心管(BD Falcon50ml 錐形離心管等),向離心管中補(bǔ)加S.O.C.培養(yǎng)基至5ml。37C,225rpm復(fù)蘇60min。