植物多酚氧化酶(PPO)ELISA檢測試劑盒特點(diǎn):
1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對(duì)免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置
植物多酚氧化酶(PPO)ELISA檢測試劑盒液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3)尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:A、檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。B、檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5)組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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