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人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪
細(xì)胞傳代的一般方法
開(kāi)始人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
xy-E12808 大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
xy-E12809 大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
xy-E12810 大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒
xy-E12811 大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒
xy-E12812 大鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
xy-E12813 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
xy-E12814 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
xy-E12815 大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
xy-E12816 大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
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xy-E12819 大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒
xy-E12820 大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒
xy-E12821 大鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒
xy-E12822 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒
xy-E12823 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒
xy-E12824 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒
xy-E12825 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒
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