雞 (Chicken) 白細(xì)胞介素-2（IL-2）ELISA 檢測試劑盒*

雞 (Chicken) 白細(xì)胞介素-2（IL-2）ELISA 檢測試劑盒

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

試驗原理：

IL-2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IL-2和*標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-2的濃度呈比例關(guān)系。

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存）

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶標(biāo)板

1塊板（96T）

半塊板（48T）

即用型

塑料膜板蓋

1塊

半塊

即用型

標(biāo)準(zhǔn)品：800pg/ml

1瓶（0.6ml）

1瓶（0.3ml）

按說明書進(jìn)行稀稀

空白對照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

即用型

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

1瓶（5ml）

1瓶（2.5ml）

即用型

*標(biāo)記的抗IL-2抗體

1瓶（6ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

親和鏈酶素-HRP

1瓶（10ml）

1瓶（5.0ml）

即用型

洗滌緩沖液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

終止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：

800 pg/ml

（6號標(biāo)準(zhǔn)品）

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

400 pg/ml

（5號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

200 pg/ml

（4號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

100 pg/ml

（3號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

50 pg/ml

（2號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

25 pg/ml

（1號標(biāo)準(zhǔn)品）

100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0 pg/ml

（空白對照）

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）

A

800

800

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

B

400

400

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

C

200

200

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

D

100

100

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

E

50

50

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

F

25

25

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

G

0

0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

H

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

局限

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié)果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的IL-2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測值范圍：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml

人羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒
人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒
人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒
人小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒
人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒
人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒
人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒
人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒
人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒
人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒
人泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒
人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒
人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒 
人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒
人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒
人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒
人TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒
人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒
人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒
人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒
人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒
人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒
人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 
人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒
人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 
人錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 
人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒
人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒
人*誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒 
人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒
人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒 
人抗菌肽(Att)ELISA試劑盒 
人顆粒溶素(GNLY)ELISA試劑盒 
人富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒
*樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒
人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒
人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒
人肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒
人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒
人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒
人纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒
人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒
人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒
人基質(zhì)γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒 
人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)ELISA試劑盒 
人螺旋肽(THP)ELISA試劑盒
人溶酶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒 
人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試劑盒 
人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒 
人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 
人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒 
人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 
人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 
人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒
人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒
人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒
人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA試劑盒
人生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒
人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒
人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒
人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒 
人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒
人?；碳さ鞍?ASP)ELISA試劑盒 
人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 
人細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒 
人復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒 
人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試劑盒 
人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T細(xì)胞活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒