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人B淋巴母細(xì)胞,H9細(xì)胞

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更新時(shí)間:2017-07-31 19:09:46瀏覽次數(shù):207次

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本公司在長(zhǎng)期的細(xì)胞研究過(guò)程中不斷優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,針對(duì)不同客戶研究需要,提供包含神經(jīng)元細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞在內(nèi)的多種原代細(xì)胞產(chǎn)品,并針對(duì)各類原代細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求研發(fā)的培養(yǎng)產(chǎn)品。原代細(xì)胞產(chǎn)品產(chǎn)品經(jīng)過(guò)細(xì)菌、真菌、霉菌、支原體和病毒檢測(cè),表達(dá)多種神經(jīng)細(xì)胞特異性標(biāo)記。原代細(xì)胞*培養(yǎng)基特別添加能有效改善細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和針對(duì)不同物種特別甄選的優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)液,適合各類原代細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

開始人B淋巴母細(xì)胞,H9細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約24天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。

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