人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒
北京方程生物與人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒有關(guān)的ELISA知識(shí)之雙抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2) 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。
洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3) 加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合
的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。
人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒
過碘酸鹽氧化法:本法只適用于含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的標(biāo)記常用此法。反應(yīng)時(shí),過碘酸鈉將HRP分子表面的多糖氧化為醛基很活潑,可與蛋白質(zhì)上的氨基形成Schiff氏堿而結(jié)合。酶標(biāo)記物按克分子比例聯(lián)結(jié),其*比例為:酶/抗體=1-2/1。此法簡(jiǎn)便有效,一般認(rèn)為是HRPzui可取的標(biāo)記方法,但也有人認(rèn)為所有試劑較為強(qiáng)烈,各批實(shí)驗(yàn)結(jié)果不易重演。
人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒
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