人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加*40μL；

4.  隨后標準品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  所有孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒

顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中，加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行，時間一般不需要嚴格控制，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當縮短或延長反應時間，及時判斷。

人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒

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