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ELISA診斷試劑經(jīng)歷了從合成肽向基因工程抗原的過渡。由于歷史的原因,人們往往以反應(yīng)本底的好壞來衡量ELISA反應(yīng)試劑盒,因此有些廠家為了保持較好的本底采用了單片段基因工程抗原及合成肽包被,該類試劑盒的流行病學(xué)敏感度不夠,穩(wěn)定性也成問題。
請(qǐng)問一下國(guó)內(nèi)的ELISA試劑盒哪個(gè)公司的做出來的效果好?是不是盒只能做一次?
回答:試劑盒現(xiàn)在市場(chǎng)上很多,國(guó)產(chǎn)的,進(jìn)口的。試劑盒一般倒是由包被的微孔,標(biāo)準(zhǔn),酶,抗體組成。微孔的數(shù)量決定你能做的樣品數(shù),一般分48孔和96孔,但是每次做實(shí)驗(yàn)時(shí)都要將標(biāo)準(zhǔn)做上,所以96孔的也就是能坐五六十個(gè)樣品。還有試劑盒的微孔都是一次使用不能重復(fù)使用。
一般試劑盒不是都分人、小鼠、大鼠的嗎?比如說ELISA雙抗夾心試劑盒,如果檢測(cè)人的抗原就要用人的試劑盒,我想問的是,這幾種試劑盒本身區(qū)別在哪里,是包被的抗體與酶標(biāo)抗體來源不同嗎,也就是說人的試劑盒就要都用人的抗體?
回答:你可能把抗原抗體弄錯(cuò)了。測(cè)人的試劑盒用的抗體是抗人的,比如測(cè)人乙肝病毒
以用小鼠抗人乙肝病毒。這樣這個(gè)抗體才能與人乙肝病毒抗原反應(yīng)。夾心法中,包被的抗體與酶標(biāo)抗體,如果是單抗,理論是不能用一樣的,不過商品化的ELISA試劑盒單抗有可能是混合單抗(識(shí)別不同的表位的抗體混在一起)這樣就又可以用一樣的。
也有廠家堅(jiān)持ELISA試劑盒高的流行病學(xué)敏感度,科學(xué)地對(duì)待反應(yīng)結(jié)果。基因工程抗原較合成肽抗原有*的*性,就HCV-ELISA試劑盒來講,*代產(chǎn)品為合成肽抗原,主要是HCV 特異性抗原決定簇的肽片段;第二代產(chǎn)品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽,只是當(dāng)時(shí)的基因工程抗原不全,僅包括了HCV的核心區(qū)片段;第三代產(chǎn)品基本上采用了基因工程抗原,而且這些抗原包括更多、更穩(wěn)定、純度更高的HCV特異性抗原。第三代試劑的敏感度大大提高了。
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