① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞

英文名稱(chēng)：Mouse primary bladder stromal fibroblasts

組織來(lái)源：膀胱組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官。它是一個(gè)囊形結(jié)構(gòu)，位于骨盆內(nèi)，其后端開(kāi)口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞作為膀胱上皮細(xì)胞的支持細(xì)胞，起著十分重要的作用。

體外培養(yǎng)膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞不僅為組織工程膀胱，尿道提供種植細(xì)胞的必要手段，也是研究膀胱纖維化的基礎(chǔ)與前提。

細(xì)胞特性：

1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常膀胱組織。

2)細(xì)胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類(lèi)型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

人肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)elisa檢測(cè)試劑盒

牛銅鋅-過(guò)氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)elisa分析檢測(cè)試劑盒

體液丙二醛（MDA）比色法定量檢測(cè)試劑盒

小鼠骨橋素(OPN)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠白介素1受體（IL-1RⅠ）elisa檢測(cè)試劑盒

狗15 - 酮基-13,14-二氫前列腺素F2α(15-keto-13,14-dihydro-PGF2α)elisa檢測(cè)試劑盒

人體（apolipoprotein）RFLP基因分析試劑盒

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠CD40配體(CD40L)elisa檢測(cè)試劑盒

4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框3抗體 C4orf3

8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體 C8orf33

即刻早期應(yīng)答基因5樣蛋白抗體 IER5L

鉀離子通道Kir2.1抗體 Kir2.1

ras基因相關(guān)蛋白Rab31抗體 RAB31

RPUSD4蛋白抗體 RPUSD4

死亡受體4抗體 TNFRSF10A

協(xié)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A11抗體 SLC5A11

FKLF蛋白抗體 FKLF

GL54D蛋白抗體 GL54D

梅克爾-格魯伯綜合征相關(guān)蛋白抗體 MKS1

鈉通道蛋白11α抗體 SCN11A

毒蕈堿型乙酰受體M1抗體 CHRM1/M-AChR M1

二甲基化組蛋白H3抗體 Histone H3 (Di Methyl K36)

血管緊張素III抗體 Angiotensin III

胰島素受體底物-1抗體 IRS1

Annexin V-FITC/PI 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒20T

突觸樣蛋白5亞型2抗體  Anti-SYTL5/slp5

Cy5.5標(biāo)記的羊抗牛IgG H&L

Goat Anti-Bovine IgG H&L / Cy5.5

小鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞FRMD7蛋白抗體

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用