細胞簡介：

輸卵管是卵子運輸、儲存、獲能，以及卵母細胞采取、運送、成熟、受精和早期胚胎發(fā)育的重要場所。輸卵管與其他空腔器官相似，其管壁由內(nèi)向外為粘膜層 (tunica mucosa)、肌層(muscular layer)和漿膜層所構(gòu)成。其中，肌層的結(jié)構(gòu)和厚度因不同節(jié)段而有差異，峽部肌層厚，管腔亦小。

細胞特性：

1）組織來源于實驗動物的正常輸卵管組織。

2)細胞鑒定：平滑肌肌動蛋白（α-SMA）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF原代 平滑肌 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)elisa分析檢測試劑盒

人白介素-15（IL-15）elisa檢測試劑盒

組織甲羥戊酸激酶（mevalonate kinase）活性比色法

C(VC)elisa檢測試劑盒

大鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)elisa分析檢測試劑盒

兔1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa檢測試劑盒

乳糖酵解溴百里酚藍（BTB）瓊脂平板

小鼠組織蛋白酶S(CTSS)elisa檢測試劑盒

大鼠前列環(huán)素(PGI2)elisa檢測試劑盒

HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5A蛋白抗體 HEATR5A

IQSEC2抗體 IQSEC2

配體依賴核受體共抑制因子樣蛋白抗體 LCORL

橋粒糖蛋白1/2抗體 Desmocollin 1 + 2

富含半胱的酸性分泌蛋白抗體 SPARC

鈣結(jié)合蛋白抗體 Calretinin

抑癌蛋白UBIAD1抗體 SCCD

載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1抗體 NR2F1/NR2F2

TSN蛋白抗體 Translin

ZCCHC5蛋白抗體 ZCCHC5

維甲酸誘導(dǎo)蛋白16抗體 RAI16

細胞分裂周期蛋白42重組兔單克隆抗體 Cdc42

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白52抗體 CCDC52

跨膜蛋白6超家族成員1抗體 TM6SF1

AF680標記的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體 CCDC98, Alexa Fluor 680 conjugated

ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 ABCB5

大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa檢測試劑盒免費代測

解旋酶SNF2L抗體  Anti-SMARCA1/SNF2L

PE-Cy3標記的驢抗人IgG H&L

Donkey Anti-Human IgG H&L / PE-Cy3

小鼠輸卵管平滑肌細胞鋅指蛋白ZBTB3抗體