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技術(shù)文章

色原底物與用于化學發(fā)光檢測的底物

閱讀:1866發(fā)布時間:2010-9-28

生成水溶性產(chǎn)物的色原底物
酶 底物 簡稱 起始顏色 終顏色 吸收峰(nm)
辣根過氧化物酶 2,2,-聯(lián)氮-雙乙基苯 ABTS 無色 綠色 410
并噻唑啉黃酸鹽 650
鄰苯二胺 OPD 無色 棕色 492
3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺 TMB 無色 黃色 450
堿性磷酸酶 對硝基酚磷酸鹽 PNPP 無色 黃色 405
β-半乳糖苷酶 鄰硝基*—β—d-P比喃半乳糖吡喃苷 ONPG 無色 黃色 410


生成非水溶性產(chǎn)物的色原底物
酶 底物 簡稱 起始顏色 終顏色 是否溶于酒精
辣根過氧化物酶 二氨基聯(lián)苯胺 DAB 無色 棕色 不溶
含鎳增強劑的二氨基聯(lián)苯胺 DAB/鎳 無色 灰色/黑色 不溶
3—氨基—9—乙基咔巴唑 AEC 五色 紅色 溶
4-氯-1萘酚 無色 藍色 溶
堿性磷酸酶 萘酚-AS-BI-磷酸鹽/快紅TRf NABP/FR 無色 紅色 溶
萘酚-AS-MX-磷酸鹽/快紅TRg NAMP/FR 無色 紅色 不溶
萘酚-AS-BI-磷酸鹽/品紅 NABP/NF 無色 紅色 不溶
溴氯吲哚磷酸鹽/硝基藍四唑 BCIP/NBT 無色 紫色 —
β-半乳糖苷酶 5-溴-4-氯-3-吲哚βd-半乳糖吡喃苷 BCIG 無色 藍色 不溶
萘酚AS-BI—β-d-吡喃半乳糖苷 NABG 無色 紅色 不溶


用于化學發(fā)光檢測的底物
儲存溶液
30%H202(4℃儲存);
250mmol/L魯米諾DMSO溶液(用鋁箔包裹,室溫儲存);
90mmol/L對羥基丙烯酸DMSO溶液(用鋁箔包裹,室溫儲存);
100mmol/LThs—HCl(pH=8.5)。
工作溶液
每次配制12ml,足夠供大量印跡顯色用
12m1 Tris—HCl(pH二8.5)
3.8ul 30%H90:
60ul 250mmol/L魯米諾
26.6ul 90mmol/L對羥基丙烯酸
注:通常在印跡條顯色之前臨時新鮮配制。將印跡條孵育1mLn,然后置底片上曝光。 上海源葉生物科技有限公司 :

 


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