[測定方法] ELISA法
[方法學原理] 在微孔表面包被純化的風疹病毒抗原。被稀釋過的患者血清加入微孔中。如存在風疹病毒抗體IgG可與微孔上抗原相結(jié)合。然后洗去未結(jié)合物質(zhì)，再加入酶聯(lián)液，與抗原抗體復(fù)合物結(jié)合。洗去過量的酶聯(lián)液。zui后加入底物和色原（顯色液）。在特定時間終止酶聯(lián)液的催化反應(yīng)。所產(chǎn)生的顏色強度與標本中風疹病毒抗體IgG含量呈正相關(guān)。通過酶標儀與校正和對照相比，讀出結(jié)果。
[標本準備] 靜脈抽血2ml，不抗凝。
[試劑]
1．微孔板
2．樣品稀釋液
3．HRP-抗人IgG酶結(jié)合物
4．陰性對照
5．陽性對照
6．洗滌劑
7．TMB顯色液
[儀器設(shè)備] 酶標儀或全自動酶聯(lián)免疫檢測儀。
（測定步驟）
1．吸取5ul血清標本加入250u1標本稀釋液中，做1：51稀釋。
2．吸取100ul稀釋過的血清、陽性對照、陰性對照和校正液（不稀釋），加入微孔板內(nèi)，設(shè)空白對照1孔。振蕩，混勻，去除孔內(nèi)液體中氣泡，室溫環(huán)境中孵育20min。
3．棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液洗5次。
4．每孔再加入100t~l酶聯(lián)結(jié)合物，室溫環(huán)境中孵育20min。
5．棄去孔中酶聯(lián)液，用洗滌液洗5次。
6．每孔加入100u1 TMB顯色液，室溫環(huán)境中孵育10min。
7．每孔加入100ul終止液，終止反應(yīng)，充分混勻。
8．用酶標儀（波長為450nm）讀取吸光度。以待測樣本吸光度大于校正液孔吸光度為陽性。
[注意事項]
1．整個檢測過程應(yīng)符合實驗室質(zhì)量手冊和生物安全守則規(guī)定，嚴防交叉污染。
2．所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
3．試劑應(yīng)保存于2—8℃冰箱，使用前應(yīng)在室溫環(huán)境中平衡30min。
4．洗滌時各孔均應(yīng)加滿洗滌液，防止孔內(nèi)有游離酶未洗凈，每次洗板后均應(yīng)在吸水紙上拍干。
5．血標本應(yīng)分離出血清保存，2～8℃可保存?d，冷凍保存可至6個月，避免反復(fù)凍融。
6．試劑在儲存或使用過程中，禁止過熱、曝曬或強光。
[正常參考值] RUV Ab-IgG陰性
[臨床意義] 風疹病毒為呼吸道傳播，人類普遍易感，育齡期婦女風疹抗體陰性率各地報道不一，為0～12．4％。
一般認為它主要引起青少年輕度發(fā)病，約70％為顯性感染，表現(xiàn)為斑丘疹、發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、白細胞升高，為自限性疾病。但母體感染，可通過胎盤傳給胎兒，引起先天性風疹病毒感染，此病可誘發(fā)胎兒發(fā)生慢性心臟病、生長遲緩、肝脾大、畸形和其他異常癥狀。若為CRS患兒，則病死率較高，尤其是出生
后頭幾個月，出生1年內(nèi)死亡者可達10％～20％。嬰兒出生可無癥狀，也可在以后發(fā)育中出現(xiàn)異常。的血清學方法檢測育齡婦女血清狀態(tài)對于減少此類并發(fā)癥具有重要意義。若血液中存在風疹病毒抗體，可抵抗此種病毒感染；缺乏此類抗體，可通過接種疫苗而獲得?？贵w效價升高，說明是急性風疹病毒感染，并有助于與其他皰疹病毒區(qū)別。風疹病毒感染的孕婦應(yīng)留意可導(dǎo)致胎兒先天性感染的危險。
RUV Ab-IgM抗體在疹后5—14d陽性率zui高，此后檢出率下降，有報道zui晚疹后66d仍陽性。患先天性風疹綜合征患兒IgM抗體陽性持續(xù)時間更長，持續(xù)1年者占50％，持續(xù)1～2年者占5％～10％。IgM抗體陽性，表示患者近期感染。因此，測定血清中風疹I(lǐng)gM抗體，對于風疹早期診斷以及決定患風疹的孕婦是否需要終止妊娠非常重要。須注意的是，風疹再感染者雖少數(shù)能查到IgM抗體，但滴度低，持續(xù)時間短；風疹病毒活疫苗接種后，絕大多數(shù)也能測出IgM抗體。
風疹患者測出RUV Ab—IgM抗體的同時，幾乎均可檢出RUVAb—IgG抗體，并持續(xù)升高，1～2個月內(nèi)仍有所上升，以后逐漸下降，·4～12個月降低至基線水平，抗體持續(xù)時間可達數(shù)年至數(shù)十年，甚至終身?；謴?fù)期血清比急性期血清的抗體滴度有4倍或4倍以上升高，可作出近期風疹感染的診斷。測定風疹I(lǐng)gG抗體，可以了解人群風疹隱性感染水平和考核疫苗的免疫效果。
