載體兩性電解質的理化性質 載體兩性電解質（carrier ampholyte）是一種脂肪族多胺基多羧基的混合物（其商品名為Ampholine）。它的pK和pI值各自相異卻又相近，即它是由異構物和同系物組成。
（一）緩沖性能強
Ampholine溶液在一定pH值范圍內有充分的緩沖能力，當?shù)鞍踪|分子進入與其等電點相應的pH值區(qū)域時，pH值并無變化。
（二）導電性能好
Ampholine溶液有均衡的電場強度，但是在pH值等于中性的區(qū)域導電性能較差。因此在應用時，不管選擇什么pH值范圍，一般都要加入占其總量1／10的pH值為6～8的Ampholine溶液，以保持電場強度的均勻性。
（三）分子質量小
Ampholine一般分子質量都在0．3～1kDa之間。這對利用層析法（如葡萄糖G—25凝膠過濾）把它和蛋白質分開是方便的。
（四）紫外吸收值低
Ampholine對于在280nm處測定蛋白質吸收值干擾小。但是，如果蛋白質濃度低，Ampholine用量又高，則往往有干擾，操作時應進行校正。
（五）一般與樣品不起化學反應
載體兩性電解質的pH值范圍與用量選擇 兩性電解質的pH值范圍選擇得當，分辨率可提高。在測定未知樣品的等電點時，可先采用pH值為3—10的兩性電解質摸索，待初步測出等電點后，再改用包括樣品pI值、pH值范圍窄的兩性電解質。
兩性電解質一般都為40％的水溶液，電聚焦的用量通常為1％一2％。實驗表明，兩性電解質用量小時，電聚焦后形成的pH值梯度較其本身的pH梯度寬；相反，用量大時，電聚焦后形成的pH梯度與其本身的pH梯度近似。此外，電聚焦的時間直接影響pH梯度的變化，時間過長或過短都不會產(chǎn)生平滑的曲線，所以電聚焦時間應嚴格控制，才能得到分辨率高的電泳圖譜，一般電泳時間以6—7h為宜。此外，聚丙烯酰胺的純度也會影響pH梯度。
