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技術(shù)文章

血清中和試驗(SN) 檢測豬繁殖與呼吸綜合征

閱讀:790發(fā)布時間:2011-4-2

一般來說,在群體水平上血清學(xué)診斷易操作,特異性強,敏感性高。但對個體的檢測則比較困難,有時出現(xiàn)非特異性反應(yīng),但可以在2~3周后取樣復(fù)測解決此問題。血清學(xué)檢測一般用吸附試驗(如IPMA、IF、ELISA),這些試驗常用某種抗原型的病毒進行,對其他抗原異型病毒抗體的靈敏度較低。應(yīng)用抗體結(jié)合試驗,在病豬感染了7~14天檢出抗病毒抗體,30~50天抗體滴度出現(xiàn)高峰。有些在病豬感染后3~6個月內(nèi)血清轉(zhuǎn)為陰性,有些病豬血清陽性維持較久。中和抗體在病豬感染后出現(xiàn)較慢,但滴度不高??稍诟腥竞?-4周檢測到中和抗體,這種抗體能維持1年或更長時間。有報道,在血清中和試驗中使用補體能提高試驗的靈敏度。關(guān)于病豬感染后血清陽性持續(xù)時間的長短,目前尚未進行廣泛深入的研究,因其有可能隨試驗方法不同而異。母源抗體半衰期為12一14天,一般仔豬在出生后4~8周內(nèi)可檢測到病毒,隨母豬生產(chǎn)時的滴度及所用試驗方法而異。在污染的環(huán)境中,血清學(xué)檢測為陽性的母豬所產(chǎn)仔豬能在3~6周齡時血清轉(zhuǎn)為陽性。應(yīng)用巨噬細胞分離病毒以及利用兩類血清型病毒的IPMA在實驗室容易操作,這種試驗可用MARC-145細胞系增殖歐洲型病毒和美洲型病毒操作。使用MARC-145細胞系做間接免疫熒光試驗(1FA)能順利進行PRRSV血清學(xué)反應(yīng)。目前,靈敏度高、特異性強商品化的ELISA試劑盒已經(jīng)上市。同時,國內(nèi)學(xué)者還開發(fā)了乳膠凝集試劑盒,可用于PRRSV抗體快速監(jiān)測。

血清中和試驗(SN) 血清中和試驗檢測PRRS抗體雖然特異性好,但PRRS的SN抗體比IFA抗體在血清中出現(xiàn)得晚,一般在感染后的4~6周才出現(xiàn)中和抗體,因此SN不適宜進行早期診斷。Christianson等(1992)報道SN的敏感性比IFA低,Yoon等(1994)對常規(guī)SN進行改良,在試驗中加入20%豚鼠血清以增加補體的含量,從而提高SN的敏感性,在感染后的9-11天即可檢測到較高滴度的SN抗體。SN抗體比IFA抗體存留的時間長,可維持半年以上。但由于對急性感染的敏感性較差,要求血清無污染,而且細胞培養(yǎng)工作量大,技術(shù)性強,目前于實驗室研究應(yīng)用。

 


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