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頂空氣相色譜系列講座(10)

閱讀:679發(fā)布時(shí)間:2015-11-17

頂空氣相色譜系列講座(10)  

頂空色譜分析方法-2



   將頂空色譜分析方法常用的設(shè)備拍成照片,圖-1樣品瓶有兩種體積(9mL,12mL),根據(jù)樣品用量不同選用;圖-2密封鉗(紅色為封瓶口鉗,黑色為開瓶口鉗);圖-3取樣器(從50μL~1000μL)能準(zhǔn)確吸取液體樣品的重要工具;圖-4加熱塊(俯視和正視可調(diào)溫度加熱塊圖,用來加熱樣品瓶)。一般用10~25μL注射器抽取液上氣體進(jìn)樣。
二、試劑和樣品
⒈ 標(biāo)準(zhǔn)樣品 含內(nèi)標(biāo)的乙醇溶液:用0.9%生理鹽水配制0.4%乙醇和0.2%特丁醇(內(nèi)標(biāo));內(nèi)標(biāo)溶液:用0.9%生理鹽水配制0.2%特丁醇(內(nèi)標(biāo));混合標(biāo)樣:用0.9%生理鹽水配制甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、異丁醇和特丁醇七種醇各0.7%。
⒉ 被測(cè)樣品——⑴ 提取死者肖小寶心血和胃內(nèi)容各5mL  ⑵ 呂某的靜脈血各4mL,密封、冰凍保存立即送檢
三、條件和圖譜
        ⒈ 色譜條件——柱溫:填充柱在100℃~160℃,毛細(xì)柱在40℃~60℃。柱前壓:填充柱在270~350kpa,毛細(xì)柱在150~180kpa。樣品瓶加熱溫度:均在75℃~85℃。樣品瓶加溫平衡時(shí)間:一般選用20~25min。
 ?、?nbsp;結(jié)果圖譜——

四、結(jié)果和討論
⑴ 加有內(nèi)標(biāo)(特丁醇)含乙醇樣品的定量分析,在數(shù)據(jù)處理?xiàng)l件設(shè)置合適情況下(如在含量低時(shí),內(nèi)設(shè)值峰寬不能用5而應(yīng)改為2、zui小面積相應(yīng)改為100,不能設(shè)為500等),實(shí)踐證明,采用土法頂空進(jìn)樣分析結(jié)果一樣準(zhǔn)確可靠,保留了頂空色譜分析方法的全部?jī)?yōu)點(diǎn)。

⑵ 樣品加熱平衡時(shí)間長(zhǎng)點(diǎn)好,一般設(shè)為20min-25min,邊加熱邊小振搖,有利乙醇的揮發(fā)。注射器在使用之前也需預(yù)熱,并用被測(cè)樣品瓶中氣體洗滌飽和后方可進(jìn)樣。

⑶ 當(dāng)頂空進(jìn)樣器壞了或分析不準(zhǔn)確時(shí),也有采用三氯乙酸沉淀蛋白,高速離心后,直接將上清液進(jìn)樣,這是一種要求在高溫下進(jìn)樣,對(duì)柱子的污染會(huì)少點(diǎn),但容易造成分離不*,計(jì)算不準(zhǔn)確的后果。

⑷ 土法頂空進(jìn)樣與頂空進(jìn)樣器進(jìn)樣主要不同在加熱塊升溫、樣品瓶加熱和振搖、抽取液上氣體和注入色譜儀進(jìn)樣口等,全過程均為人工控制,手動(dòng)完成,與頂空進(jìn)樣器全過程是自動(dòng)化不同,容易造成重現(xiàn)性差。如內(nèi)標(biāo)物選擇適當(dāng),操作誤差不影響分析結(jié)果,但同一時(shí)間內(nèi)平行操作十分重要。

⑸ 土法頂空進(jìn)樣需用注射針,一般使用10-25μL或1.0mL體積,在進(jìn)樣前需將注射針先預(yù)熱,用被測(cè)液上氣相抽洗或飽和注射針,然后抽取所需體積的氣體注入氣相色譜進(jìn)樣口,全部操作在相同條件下進(jìn)行。


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