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技術(shù)文章

部分培養(yǎng)基的配制

點(diǎn)擊次數(shù):2023 發(fā)布時(shí)間:2010-12-16

一、淀粉瓊脂培養(yǎng)基(高氏1號(hào)培養(yǎng)基,培養(yǎng)放線菌用)

    可溶性淀粉 20g

    KNO3  1g

  NaCl 0.5g

  K2 HPO4  0.5g

  MgSO4  0.5g

  FeSO4  0.01g

  瓊脂 20g

  水 1000ml

  pH 7.2—7.4

  配制時(shí),先用少量冷水,將淀粉調(diào)成糊狀,在火上加熱,邊攪拌邊加水及其他成分,溶化后,補(bǔ)足水分至1000ml。1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

二、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(培養(yǎng)細(xì)菌用)

  牛肉膏 3g

  蛋白胨 10g

  NaCl 5g

  瓊脂 15—20g

  水 1000ml

  pH 7.0—7.2

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

三、馬丁氏(Martin)瓊脂培養(yǎng)基(分離真菌用)

  葡萄糖 10g

  蛋白胨 5g

  KH2 PO4  1g

  MgSO4 ·7H2 O 0.5g

  1/3000孟加拉紅(rose bengal,玫瑰紅水溶液)

  100ml

  瓊脂 15—20g

  pH 自然

  蒸餾水 800ml

  0.56kg/cm2?。?磅/英寸2?。?,112.6℃滅菌30分鐘。

  臨用前加入0.03%*稀釋液100ml,使每毫升培養(yǎng)基中含*30μg。

四、馬鈴薯培養(yǎng)基

  馬鈴薯 200g

  蔗糖(或葡萄糖) 20g

  瓊脂 15—20g

  水 1000ml

  pH 自然

  馬鈴薯去皮,切成塊煮沸半小時(shí),然后用紗布過(guò)濾,再加糖及瓊脂,溶化后補(bǔ)足水至1000ml。1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

五、麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基

  1.取大麥或小麥若干,用水洗凈,浸水6—12小時(shí),置15℃陰暗處發(fā)芽,上蓋紗布一塊,每日早、中、晚淋水一次,麥根伸長(zhǎng)至麥粒的兩倍時(shí),即停止發(fā)芽,攤開(kāi)曬干或烘干,貯存?zhèn)溆谩?/p>

  2.將干麥芽磨碎,一份麥芽加四份水,在65℃水浴鍋中糖化3—4小時(shí),糖化程度可用碘滴定之。

  3.將糖化液用4—6層紗布過(guò)濾,濾液如混濁不清,可用雞蛋白澄清,方法是將一個(gè)雞蛋白加水約20ml,調(diào)勻至生泡沫時(shí)為止,然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過(guò)濾。

  4.將濾液稀釋到5—6波美度,pH約6.4,加入2%瓊脂即成。

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

六、半固體肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

  肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基 100ml

  瓊脂 0.35—0.4g

  pH 7.6

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

七、葡萄糖-醋酸鹽培養(yǎng)基

  葡萄糖 1g

  酵母浸膏 2.5g

  醋酸鈉 8.2g

  瓊脂 15g

  蒸餾水 1000ml

  pH 4.8

  分裝試管,0.70kg/cm2 (10磅/英寸2?。?15.2℃滅菌20分鐘后制成斜面。

八、合成培養(yǎng)基

 ?。∟H4?。? PO4  1g

  KCl 0.2g

  MgSO4 ·7H2 O 0.2g

  豆芽汁 10ml

  瓊脂 20g

  蒸餾水 1000ml

  pH 7.0

  加12ml0.04%的溴甲酚紫(pH5.2—6.8,顏色由黃色變紫色,作指示劑)。1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

九、油脂培養(yǎng)基
  
    蛋白胨 10g

  牛肉膏 5g

  NaCl 5g

  香油或花生油 10g

  1.6%中性紅水溶液 1ml

  瓊脂 15—20g

  蒸餾水 1000ml

  pH 7.2

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

  注:1.不能使用變質(zhì)油。

  2.油和瓊脂及水先加熱。

  3.調(diào)好pH后,再加入中性紅。

  4.分裝時(shí),需不斷攪拌,使油均勻分布于培養(yǎng)基中。

十、明膠培養(yǎng)基

  牛肉膏蛋白胨液 100ml

  明膠 12—18g

  pH 7.2—7.4

  在水浴鍋中將上述成分溶化,不斷攪拌。溶化后調(diào)pH7.2—7.4。

  0.56kg/cm2?。?磅/英寸2 ),112.6℃滅菌30分鐘。

十一、淀粉培養(yǎng)基

  蛋白胨 10g

  NaCl 5克

  牛肉膏 5克

  可溶性淀粉 2g

  蒸餾水 1000ml

  瓊脂 15—20g

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

十二、蛋白胨水培養(yǎng)基

  蛋白胨 10g

  NaCl 5克

  水 1000ml

  pH 7.6

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

十三、明膠培養(yǎng)基

  牛肉膏蛋白胨液 100ml

  明膠 12—18g

  pH 7.2—7.4

  在水浴鍋中將上述成分溶化,不斷攪拌。溶化后調(diào)pH7.2—7.4。

  0.56kg/cm2?。?磅/英寸2?。?,112.6℃滅菌30分鐘。

十四、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基

  蛋白胨 5g

  葡萄糖 5g

  K2 HPO4  2g

  蒸餾水 1000ml

  將上述各成分溶于1000ml水中,調(diào)pH7.0—7.2,過(guò)濾。分裝試管,每管10ml,0.56kg/cm2?。?磅/英寸2?。?12.6℃滅菌30分鐘。

十五、酪蛋白培養(yǎng)基

  KH2 PO4  0.36g

  Na2 HPO4 ·12H2 O 1.3g

  NaCl 0.1g

  ZnSO4 ·7H2 O 0.02g

  CaCl2 ·2H2 O 0.002g

  酪素 4g

  酪素水解氨基酸 0.05g

  瓊脂 15—20g

  蒸餾水 1000ml

  pH 7.0—7.2

  先稱(chēng)取4g酪素,再加入0.5mol/LNaOH約2ml,將酪素溶解;然后依次加入其他藥品,zui后調(diào)pH7.0—7.2。0.56kg/cm2?。?磅/英寸2?。?12.6℃滅菌30分鐘。

十六、*培養(yǎng)基(TYEG培養(yǎng)基)

  胰蛋白胨 10g

  酵母浸膏 5g

  K2 HPO4  3g

  葡萄糖 1g

  瓊脂 15—20g

  蒸餾水 1000ml

  pH 7.0

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

十七、基本培養(yǎng)基(MM培養(yǎng)基)

 ?。∟H4 )2 SO4  1g

  K2 HPO4  7g

  KH2 PO4  3g

  檸檬酸鈉 0.5g

  MgSO4 ·7H2 O 0.1g

  葡萄糖 5g

  瓊脂 15—20g

  蒸餾水 1000ml

  1.05kg/cm2 ,121.3℃滅菌20分鐘。

十八、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)

  蛋白胨水瓊脂培養(yǎng)基 100ml

  20%乳糖溶液 2ml

  2%伊紅水溶液 2ml

  0.5%美藍(lán)水溶液 1ml

  將已滅菌的蛋白胨水瓊脂培養(yǎng)基(pH7.6)加熱溶化,冷卻至60℃左右時(shí),再把已滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液及美藍(lán)水溶液按上述量以無(wú)菌操作加入。搖勻后,立即倒平板。乳糖在高溫滅菌易被破壞必須嚴(yán)格控制滅菌溫度,一般是0.70kg/cm2?。?0磅/英寸2?。?,115.2℃滅菌20分鐘。

十九、乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(“水的細(xì)菌學(xué)檢查”用)

  蛋白胨 10g

  牛肉膏 3g

  乳糖 5g

  NaCl 5g

  1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml

  蒸餾水 1000ml

  將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及Nacl加熱溶解于1000ml蒸餾水中,調(diào)pH至7.2—7.4。加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml,充分混勻,分裝于有小倒管的試管中。0.70kg/cm2?。?0磅/英寸2?。?,115.2℃滅菌20分鐘。


二十、復(fù)紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基(遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基)

  蛋白胨 10g

  乳糖 10g

  K2 HPO4  3.5g

  瓊脂 20—30g

  蒸餾水 1000ml

  無(wú)水亞硫酸鈉 5g左右

  5%堿性復(fù)紅乙醇溶液 20ml

  先將瓊脂加入900ml蒸餾水中,加熱溶解,再加入*及蛋白胨,使溶解,補(bǔ)足蒸餾水至1000ml,調(diào)pH至7.2—7.4。加入乳糖,混勻溶解后,0.70kg/cm2?。?0磅/英寸2?。?,115.2℃滅菌20分鐘。稱(chēng)取亞硫酸鈉置一無(wú)菌空試管中,加入無(wú)菌水少許使溶解,再在水浴中煮沸10分鐘后,立刻滴加于20ml5%堿性復(fù)紅乙醇溶液中,直至深紅色褪成淡粉紅色為止。將此亞硫酸鈉與堿性復(fù)紅的混合液全部加至上述已滅菌的并仍保持溶化狀態(tài)的培養(yǎng)基中,充分混勻,倒平皿,放冰箱備用。貯存時(shí)間不宜超過(guò)2周。

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