預(yù)期用途
此BIOSERV 胰腺彈性蛋白酶ELISA檢測試劑盒能用于糞便樣品中胰腺彈性蛋白酶的定量檢測,作為胰腺外分沁功能的輔助檢測工具.
簡介及臨床意義
用于慢性胰腺炎, 囊胞性纖維癥, 糖尿病, 舒瓦克曼綜合征等疾病引起胰腺分泌不足的體外診斷. 本試劑盒能用于定量檢測糞便樣本中胰腺彈性蛋白酶的含量,作為胰腺分泌不足的輔助檢測. 胰腺彈性蛋白酶ELISA 已經(jīng)過FDA注冊認(rèn)證.
此BIOSERV胰腺彈性蛋白酶ELISA檢測試劑盒基于’’三明治”夾心法原理, 用于胰腺外分沁不足的體外診斷.
實(shí)驗(yàn)原理
BIOSERV 胰腺彈性蛋白酶ELISA檢測試劑盒基于’’三明治”夾心法原理, 采用2種特異性識別人胰腺彈性蛋白酶表面決定簇的多克隆抗體. 試劑盒微孔中預(yù)包被有能特異性結(jié)合樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的胰腺彈性蛋白酶抗體. 加樣后,再加入*標(biāo)記抗體,結(jié)合到固相的胰腺彈性蛋白酶. 再加入鏈霉親和素標(biāo)記辣根過氧化酶結(jié)合物, 催化TMB底物液. 加入0.25 mol/l 的硫酸終止酶反應(yīng).zui后在酶標(biāo)儀450 nm讀取其吸光度.
試劑
足夠用于96人份檢測
1參考標(biāo)準(zhǔn)品(即用)-每瓶 0.7 ml
-標(biāo)準(zhǔn)品1(50 µg彈性蛋白酶/g-無色蓋)
-標(biāo)準(zhǔn)品2(100µg彈性蛋白酶/g-白色蓋)
-標(biāo)準(zhǔn)品3(200 µg彈性蛋白酶/g-黃色蓋)
-標(biāo)準(zhǔn)品4(500 µg彈性蛋白酶/g-藍(lán)色蓋)
2質(zhì)控1 (約90 µg彈性蛋白酶/g±20%-棕色蓋) 0.7 ml
含0.2%*
3質(zhì)控2 (約200 µg彈性蛋白酶/g±20%-綠色蓋) 0.7 ml
含0.2%*
4洗滌液(10倍濃縮) 2 x 50 ml
5提取緩沖液(10倍濃縮) 50 ml
6 *化抗體(二抗- 紅色蓋) 0.12 ml
7鏈霉親和素-過氧化酶結(jié)合物(即用) 8 ml
8底物液 (TMB底物液,即用) 13 ml
9終止液 (0.25 mol/l H2SO4,即用) 13 ml
10微孔反應(yīng)板,包被有多克隆抗彈性蛋白抗體 96 孔
11 單條固定架 1 x
實(shí)驗(yàn)所需器材(但實(shí)驗(yàn)盒沒有提供)
1帶450nm過濾裝置,可選550 nm.的酶標(biāo)儀
2帶一次性吸嘴的微移液管: 5 µl, 50 µl, 100 µl 和1000 µl.
3試管
4蒸餾水或去離子水
5吸水紙
注意事項(xiàng)
1試劑盒僅供體外診斷用
2避免接觸終止液,終止液會(huì)刺激和灼傷皮膚
3切勿用嘴移液
4請使用標(biāo)準(zhǔn)的移液管和儀器
5小心處理樣品并視其為潛在感染物質(zhì)
6根據(jù)國家生物危害安全條例及規(guī)范處理及使用
存儲(chǔ)說明及保質(zhì)期
1試劑存儲(chǔ)于2 – 8 °C (36 °F – 46 °F),避免冰凍試劑盒或其成分
2未開封的試劑盒于有效期內(nèi)穩(wěn)定
請注意:如果試劑盒被開封使用, 剩余未用試劑盒可能會(huì)短于標(biāo)簽上的有效期.所有成分在使用后都應(yīng)密封保存于2-8 °C并于4周內(nèi)用完. 否則可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的差異.
3 稀釋洗滌液于2 °C – 8 °C / 36 °F – 46 °F可穩(wěn)定保存4周
4稀釋提取緩沖液于2 °C – 8 °C / 36 °F – 46 °F可穩(wěn)定保存4周
5 使用后應(yīng)立即蓋上蓋子
6 微孔反應(yīng)板應(yīng)于含有干燥劑的袋子保存. 未使用的微孔反應(yīng)板應(yīng)重新密封于含有干燥劑的袋子中. 這種存儲(chǔ)條件下,開封的試劑盒至少能保存4周.
樣品
人糞便
樣品收集及準(zhǔn)備
1使用新鮮準(zhǔn)備的糞便樣品. 小心處理,視其為可感染物質(zhì).
2樣品在不同的溫度下存儲(chǔ)的不同保質(zhì)期
- 室溫至40 °C (104 °F): 保存5天
- (2 °C – 8 °C / 36 °F – 46 °F): 保存1周
- (-18 °C – -20 °C / 0 °F – -4 °F): 保存1年
糞便樣品準(zhǔn)備
1提取緩沖液的準(zhǔn)備(10倍濃縮)
用蒸餾水或去離子水按1:10的比例稀釋提取緩沖液.(即50 ml + 450 ml), 稀釋提取緩沖液置2-8 °C下可保存至有效期
2 糞便樣品稱重
-稱取30–100 mg(天平靈敏度達(dá)1 mg)糞便樣品置于12 ml 的試管中.再用1 ml 的稀釋提取液稀釋10 mg 的糞便樣品.(例: 70 mg樣品+7ml 稀釋緩沖液,83 mg樣品+8.3ml 稀釋緩沖液)
-使用漩渦混合儀充分混勻.(約2分鐘),待固定成分沉淀.(至少30分鐘),zui后取其上清液用于實(shí)驗(yàn)檢測. 2-8 °C下過夜提取可得到*實(shí)驗(yàn)結(jié)果
請注意:如果提供緩沖液或洗液液出現(xiàn)鹽結(jié)晶,使用前于30-35 °C水浴加熱混合溶解.
實(shí)驗(yàn)上清液可置于-18 °保存4周.
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