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技術(shù)文章

DNA合成的磷酰二酯法

閱讀：614發(fā)布時間：2011-10-13

磷酸二酯法的基本原理是將兩個分別在5，或3，端帶有適當(dāng)保護(hù)基的脫氧核苷酸連接起來，形成一個帶有磷酸二酯鍵的脫氧二核苷酸。所采用的原料是脫氧核苷酸和脫氧單核苷酸，它們都是多功能團(tuán)的化合物。

因此，為了保證合成反應(yīng)能夠定向地進(jìn)行，必須將不參加反應(yīng)的基團(tuán)用適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)選擇性地保護(hù)起來，原則是不論是5’保護(hù)基團(tuán)還是3’保護(hù)基團(tuán)，都要能夠用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ?。一端脫保護(hù)的二核苷酸分子，又能同另一個帶3’保護(hù)基團(tuán)的單核苷酸進(jìn)行第二次縮合反應(yīng)，形成一個三核苷酸分子。

這樣從縮合反應(yīng)開始，到保護(hù)基團(tuán)的消除，再進(jìn)行新一輪縮合反應(yīng)。如此反復(fù)進(jìn)行多次，直到獲得所需長度的寡脫氧核苷酸為止。

 


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