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技術(shù)文章

熱誘導(dǎo)的抗原修復(fù)(AR)的影響因素

閱讀:699發(fā)布時(shí)間:2011-10-17

AR的影響因素很多,但zui主要的還是溫度和抗原修復(fù)液的pH值。

Biddol等(1999)三實(shí)驗(yàn)結(jié)果已證實(shí),要想獲得滿意的結(jié)果,溫度是zui為重要的影響因素。將存檔的蠟塊作連續(xù)切片,利用4種抗原修復(fù)介質(zhì),其中包括檸檬酸緩沖液、EDTA、Tris鹽和金屬緩沖液,二十種不同一抗,抗原修復(fù)溫度采用室溫和37~C,時(shí)間為8—72h,結(jié)果全部為弱陽性或陰性:當(dāng)然也不能排除將切片浸在緩沖液中更長時(shí)間(幾個(gè)月或幾年)可以獲得滿意結(jié)果的可能性。

Shi等(2001)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證實(shí),溫度與修復(fù)時(shí)間呈負(fù)相關(guān)。另外,抗原修復(fù)液的:H值也是一個(gè)相當(dāng)重要的影響因素,一般抗原修復(fù)液pH值為6.0或8.5。

雖然,抗原修復(fù)技術(shù)zui主要的影響因素是溫度和pH值,但也不能忽視其他的影響因素.例如修復(fù)方式、修復(fù)介質(zhì)和修復(fù)時(shí)間。作者實(shí)驗(yàn)室用改進(jìn)的CSA(催化信號放大)方法檢測p331Ncl在胃癌和肝癌中的表達(dá),單獨(dú)用pH6.0檸檬酸緩沖液(CB)或pH8.0 ED—TA作抗原修復(fù)液,其陽性產(chǎn)物極大部分在細(xì)胞漿內(nèi)表達(dá);當(dāng)CB和EDTA聯(lián)合應(yīng)用時(shí),其陽性表達(dá)極大部分在核內(nèi),陽性率也提高。該結(jié)果說明對于個(gè)別抗原的檢測,尤其是基因產(chǎn)物,抗原修復(fù)液的選擇也相當(dāng)重要。


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