IL-10由輔助性T細胞亞群THl和TH2，單核細胞、巨噬細胞、B細胞和角質(zhì)細胞（keratinocyte）產(chǎn)生。其生物活性廣泛，可選擇性地抑制單核一巨噬細胞的某些功能，對T細胞、B細胞等的功能亦有明顯影響?，F(xiàn)已獲得重組的鼠和人IL-10及其特異性McAb。B細胞等在正常狀態(tài)下可分泌一定量的IL-10，用LIS刺激可使其產(chǎn)量明顯增加，誘生高峰在孵育18h后。
（一）ELISA試驗
用IL-10McAb包被反應板，以*結(jié)合的第二抗體進行夾心法ELISA檢測IL-10活性或含量。
（二）生物活性測定法
可根據(jù)IL-10對抗原刺激THl細胞產(chǎn)生IFN-7的抑制作用測定其活性。若不能維持培養(yǎng)Tul細胞，可用PHA刺激的脾細胞代替。
1．向96孔培養(yǎng)板每孔加50／zLRPMI-1640和50ul待測標本，并設置IL-10標準品（40ne／mL）對照，每一標本及對照組均設置3個復孔。
2．混勻后，自H排每孔取50gL加入G排，混勻后，自G排每孔取501~L加入F排，如此類推直至B排，A排作為陰性對照。
3．以2 500rad~C。照射鼠脾細胞，洗滌并計數(shù)，用RPMI-1640調(diào)整細胞濃度至2X107／mL。
4．用RPMI-1640洗THl細胞，用含抗原的培養(yǎng)液（終濃度為0．04％雞紅細胞）調(diào)整細胞濃度至2X106／mL。
5．將步驟（3）和（4）所得脾細胞和T細胞等體積混合，如可能存在IL-2、IL-4或TGF-b時，加相應MeAb對照（抗IL-4 5弘g／mL；抗IL-2 2ng／mL；抗TGF-p10ng／mL）。
6．每孔加501aLT細胞、脾細胞、抗原混合液，37~C C02溫箱中培養(yǎng)24h。
7．從每孔中取上清50／uL（注意勿吸出細胞），測上清的IFN-r，繪制標準曲線，并計算IL-10濃度。
