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上海博耀生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年

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單克隆抗體:
 ?。╩onoclonal antibody,McAb)克隆選擇學(xué)說(shuō):淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,一種細(xì)胞帶一種受體,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,使之活化,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,分泌同樣的抗體。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,如果要把這些抗體一一分開,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,兔抗血清通常含有高親和力抗體,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位;其次,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原;第三,由于兔脾臟較大,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),使得高通量篩選融合成為可能。
抗體的功能:
  抗體的主要功能是與抗原(包括外來(lái)的和自身的)相結(jié)合,從而有效地清除侵入機(jī)體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物,抗體(antibody)是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合。這種結(jié)合可以使抗原失活,也可能無(wú)效但有時(shí)也會(huì)對(duì)機(jī)體造成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生,對(duì)人體可造成危害。
多克隆抗體:
定義1:由多個(gè)B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體,可與不同抗原表位結(jié)合且免疫球蛋白類別各異。
所屬學(xué)科:免疫學(xué)(一級(jí)學(xué)科);免疫系統(tǒng)(二級(jí)學(xué)科);免疫分子(三級(jí)學(xué)科)
定義2:對(duì)特定抗原所產(chǎn)生的一組免疫球蛋白混合物,每種免疫球蛋白能識(shí)別抗原分子上的一個(gè)表位。
所屬學(xué)科:生物化學(xué)與分子生物學(xué)(一級(jí)學(xué)科);總論(二級(jí)學(xué)科)
定義3:多種抗原表位刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)后,機(jī)體產(chǎn)生的針對(duì)不同抗原表位的混合抗體。
所屬學(xué)科:細(xì)胞生物學(xué)(一級(jí)學(xué)科);細(xì)胞免疫(二級(jí)學(xué)科)
zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種(γ)球蛋白。后來(lái)發(fā)現(xiàn),抗體并不都在γ區(qū);并且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性。
   1964年,世界衛(wèi)生組織舉行專門會(huì)議,將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(Ig),如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血癥、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學(xué)的概念,而抗體是生物學(xué)功能的概念??梢哉f(shuō),幾乎所有抗體都是免疫球蛋白(極少數(shù)抗體為RNA),但并非所有免疫球蛋白都是抗體。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:
  1、制備抗原。  
 2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
  3、動(dòng)物免疫。  
 4、試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫。
  5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。
  6、純化出抗體。  
 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
  

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