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產(chǎn)品型號(hào)XB1529
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2018-09-12 09:45:13瀏覽次數(shù):492次
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PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細(xì)胞CD
人宮頸癌
CASKI
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動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞比較:
動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞相比較,具有很多相似的地方,如動(dòng)物細(xì)胞也具有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核等結(jié)構(gòu)。但是動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞又有一些重要的區(qū)別,如動(dòng)物細(xì)胞的zui外面是細(xì)胞膜,沒(méi)有細(xì)胞壁;動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中不含葉綠體,也不形成中央液泡。
總之,不論是植物還是動(dòng)物,都是由細(xì)胞構(gòu)成的。細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。
細(xì)胞
英文名:CELL
在文章中簡(jiǎn)稱C。細(xì)胞并沒(méi)有統(tǒng)一的定義,近年來(lái)比較普遍的提法是:細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位。已知除病毒之外的所有生物均由細(xì)胞所組成,但病毒生命活動(dòng)也必須在細(xì)胞中才能體現(xiàn)。一般來(lái)說(shuō),細(xì)菌等絕大部分微生物以及原生動(dòng)物由一個(gè)細(xì)胞組成,即單細(xì)胞生物;高等植物與高等動(dòng)物則是多細(xì)胞生物。細(xì)胞可分為兩類:原核細(xì)胞、真核細(xì)胞。但也有人提出應(yīng)分為三類,即把原屬于原核細(xì)胞的古核細(xì)胞獨(dú)立出來(lái)作為與之并列的一類。研究細(xì)胞的學(xué)科稱為細(xì)胞生物學(xué)。世界上現(xiàn)存zui大的細(xì)胞為鴕鳥的卵子。
傳代培養(yǎng)中的細(xì)胞傳代培養(yǎng)(subculture),當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞不斷分裂,一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長(zhǎng)速度減慢甚至停止;另一方面也會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長(zhǎng)或發(fā)生中毒。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)。這個(gè)過(guò)程就稱為傳代(passage)或者再培養(yǎng)(subculture)。對(duì)單層培養(yǎng)而言,80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段.
實(shí)驗(yàn)步驟
1.人無(wú)菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。
2.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。
3.超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。
4.打開(kāi)超凈臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉超凈臺(tái)的紫外燈,打開(kāi)抽風(fēng)機(jī)清潔空氣,除去臭氧。
5.點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi)。
6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
7.倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。
8.每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中。
9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7~10mL/大瓶,3~5mL/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn),以利于CO2氣體的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
10.對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做??蓪⒓?xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
傳代方法:
1.懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代
離心法傳代:離心(1000轉(zhuǎn)/分)去上清,沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。v2.半懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代(Hela細(xì)胞)
此類細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象,但貼壁不牢,可用直接吹打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來(lái),進(jìn)行傳代。
3.貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞傳代
采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。
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