人骨肉瘤細(xì)胞

SW 1353

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相關(guān)知識(shí)>>>>

基本共性:
　　1、所有的細(xì)胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質(zhì)及糖被構(gòu)成的生物膜，即細(xì)胞膜。
　　2、所有的細(xì)胞都含有兩種核酸：即DNA與RNA。
　　3、作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。
　　4、作為蛋白質(zhì)合成的機(jī)器─核糖體，毫無(wú)例外地存在于一切細(xì)胞內(nèi)，核糖體，是蛋白質(zhì)合成的機(jī)器，在細(xì)胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
　　5、所有細(xì)胞的增殖都以一分為二的方式進(jìn)行分裂。
　　6、能進(jìn)行自我增殖和遺傳
　　7、新陳代謝
　　8、細(xì)胞都具有運(yùn)動(dòng)性，包括細(xì)胞自身的運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞內(nèi)部的物質(zhì)運(yùn)動(dòng)
　　注：病毒不含
　　實(shí)驗(yàn)步驟
　　1．人無(wú)菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒雙手。
　　2．倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。
　　3．超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔，用0.1％新潔爾滅溶液擦凈。
　　4．打開(kāi)超凈臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右，關(guān)閉超凈臺(tái)的紫外燈，打開(kāi)抽風(fēng)機(jī)清潔空氣，除去臭氧。
　　5．點(diǎn)燃酒精燈；取出無(wú)菌試管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮頭；過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi)。
　　6．將培養(yǎng)用液瓶口用75％酒精消毒，過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
　　7．倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下。
　　8．每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶，小瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中。
　　9．加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基（7～10mL／大瓶，3～5mL／小瓶）制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋，適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn)，以利于CO2氣體的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
　　10．對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟7-9不做?？蓪⒓?xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
除病毒外的所有生物，都由細(xì)胞構(gòu)成。自然界中既有單細(xì)胞生物，也有多細(xì)胞生物。細(xì)胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。細(xì)胞是生物界中，*一部分。
　　細(xì)胞是生命的基本單位，細(xì)胞的特殊性決定了個(gè)體的特殊性，因此，對(duì)細(xì)胞的深入研究是揭開(kāi)生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。細(xì)胞生物學(xué)已經(jīng)成為當(dāng)代生物科學(xué)中發(fā)展zui快的一門(mén)*學(xué)科，是生物、農(nóng)學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關(guān)專(zhuān)業(yè)的一門(mén)必修課程。50年代以來(lái)諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)大都授予了從事細(xì)胞生物學(xué)研究的科學(xué)家。
細(xì)胞壁（Cell Wall）:
　　位于植物細(xì)胞的zui外層，是一層透明的薄壁。它主要是由纖維素和果膠組成的，孔隙較大，物質(zhì)分子可以自由透過(guò)。細(xì)胞壁對(duì)細(xì)胞起著支持和保護(hù)的作用。
傳代培養(yǎng)是組織培養(yǎng)常規(guī)保種方法之一。也是幾乎所有細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細(xì)胞才能繼續(xù)生長(zhǎng)。這一過(guò)程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實(shí)驗(yàn)所需。傳代要在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行，每一步都需要認(rèn)真仔細(xì)的無(wú)菌操作。