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產(chǎn)品型號(hào)XB1509
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2018-09-12 09:45:13瀏覽次數(shù):464次
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PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細(xì)胞CD
人肺鱗癌細(xì)胞
SK-MES-1
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實(shí)驗(yàn)步驟
1.人無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。
2.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。
3.超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。
4.打開超凈臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉超凈臺(tái)的紫外燈,打開抽風(fēng)機(jī)清潔空氣,除去臭氧。
5.點(diǎn)燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)。
6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
7.倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。
8.每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中。
9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7~10mL/大瓶,3~5mL/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn),以利于CO2氣體的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
10.對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做??蓪⒓?xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞壁(Cell Wall):
位于植物細(xì)胞的zui外層,是一層透明的薄壁。它主要是由纖維素和果膠組成的,孔隙較大,物質(zhì)分子可以自由透過。細(xì)胞壁對(duì)細(xì)胞起著支持和保護(hù)的作用。
細(xì)胞質(zhì)(Cytoplasm):
細(xì)胞膜包著的黏稠透明的物質(zhì),叫做細(xì)胞質(zhì)。在細(xì)胞質(zhì)中還可看到一些帶折光性的顆粒,這些顆粒多數(shù)具有一定的結(jié)構(gòu)和功能,類似生物體的各種器官,因此叫做細(xì)胞器。例如,在綠色植物的葉肉細(xì)胞中,能看到許多綠色的顆粒,這就是一種細(xì)胞器,叫做葉綠體。綠色植物的光合作用就是在葉綠體中進(jìn)行的。在細(xì)胞質(zhì)中,往往還能看到一個(gè)或幾個(gè)液泡,其中充滿著液體,叫做細(xì)胞液。在成熟的植物細(xì)胞中,液泡合并為一個(gè)中央大液泡,其體積占去整個(gè)細(xì)胞的大半。細(xì)胞質(zhì)被擠壓為一層。細(xì)胞膜以及液泡膜和兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)稱為原生質(zhì)層。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.人無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。
2.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。
3.超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。
4.打開超凈臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉超凈臺(tái)的紫外燈,打開抽風(fēng)機(jī)清潔空氣,除去臭氧。
5.點(diǎn)燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)。
6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
7.倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。
8.每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中。
9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7~10mL/大瓶,3~5mL/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn),以利于CO2氣體的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
10.對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做??蓪⒓?xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
按照常規(guī)的組織學(xué)分類方法,脊椎動(dòng)物和人體細(xì)胞類型約有200余種。
這些細(xì)胞在人體中呈現(xiàn)有序的空間分布。
細(xì)胞是人體的結(jié)構(gòu)和功能單位。共約有40萬--60萬億個(gè),細(xì)胞的平均直徑在10--20微米之間。
除成熟的紅血球外,所有細(xì)胞都有一個(gè)細(xì)胞核,是調(diào)節(jié)細(xì)胞作用的中心。
zui大的是成熟的卵細(xì)胞,直徑在0.1毫米以上;zui小的是血小板,直徑只有約2微米。
而175000個(gè)精子細(xì)胞才抵得上一個(gè)卵細(xì)胞的重量。
腸粘膜細(xì)胞的壽命為3天,肝細(xì)胞壽命為500天,而腦與骨髓里的神經(jīng)細(xì)胞的壽命有幾十年, 同人體壽命幾乎相等。血液中的白細(xì)胞有的只能活幾小時(shí)?! ≡谡麄€(gè)人體中,每分鐘有1億個(gè)細(xì)胞死亡。
zui為神奇的是大腦的神經(jīng)細(xì)胞的神經(jīng)沖動(dòng)傳遞速度超過400公里/小時(shí),相當(dāng)于777飛機(jī)速度的一半。
每個(gè)細(xì)胞中含有的分子數(shù)相當(dāng)于銀河系中星星數(shù)量的一萬倍那么多!
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