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MR1 [derivative of HB-11048]中國倉鼠X小鼠
PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細胞CD
人肺鱗癌細胞
SK-MES-1
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實驗步驟
1.人無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。
2.倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養(yǎng)用液置37℃下預熱。
3.超凈臺臺面應整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。
4.打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉超凈臺的紫外燈,打開抽風機清潔空氣,除去臭氧。
5.點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內。
6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
7.倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。
8.每個大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中。
9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7~10mL/大瓶,3~5mL/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉,以利于CO2氣體的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
10.對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。可將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細胞壁(Cell Wall):
位于植物細胞的zui外層,是一層透明的薄壁。它主要是由纖維素和果膠組成的,孔隙較大,物質分子可以自由透過。細胞壁對細胞起著支持和保護的作用。
細胞質(Cytoplasm):
細胞膜包著的黏稠透明的物質,叫做細胞質。在細胞質中還可看到一些帶折光性的顆粒,這些顆粒多數具有一定的結構和功能,類似生物體的各種器官,因此叫做細胞器。例如,在綠色植物的葉肉細胞中,能看到許多綠色的顆粒,這就是一種細胞器,叫做葉綠體。綠色植物的光合作用就是在葉綠體中進行的。在細胞質中,往往還能看到一個或幾個液泡,其中充滿著液體,叫做細胞液。在成熟的植物細胞中,液泡合并為一個中央大液泡,其體積占去整個細胞的大半。細胞質被擠壓為一層。細胞膜以及液泡膜和兩層膜之間的細胞質稱為原生質層。
實驗步驟
1.人無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。
2.倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養(yǎng)用液置37℃下預熱。
3.超凈臺臺面應整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。
4.打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉超凈臺的紫外燈,打開抽風機清潔空氣,除去臭氧。
5.點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內。
6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
7.倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。
8.每個大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中。
9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7~10mL/大瓶,3~5mL/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉,以利于CO2氣體的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
10.對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做??蓪⒓毎麘乙哼M行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
按照常規(guī)的組織學分類方法,脊椎動物和人體細胞類型約有200余種。
這些細胞在人體中呈現有序的空間分布。
細胞是人體的結構和功能單位。共約有40萬--60萬億個,細胞的平均直徑在10--20微米之間。
除成熟的紅血球外,所有細胞都有一個細胞核,是調節(jié)細胞作用的中心。
zui大的是成熟的卵細胞,直徑在0.1毫米以上;zui小的是血小板,直徑只有約2微米。
而175000個精子細胞才抵得上一個卵細胞的重量。
腸粘膜細胞的壽命為3天,肝細胞壽命為500天,而腦與骨髓里的神經細胞的壽命有幾十年, 同人體壽命幾乎相等。血液中的白細胞有的只能活幾小時?! ≡谡麄€人體中,每分鐘有1億個細胞死亡。
zui為神奇的是大腦的神經細胞的神經沖動傳遞速度超過400公里/小時,相當于777飛機速度的一半。
每個細胞中含有的分子數相當于銀河系中星星數量的一萬倍那么多!
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