H1299細(xì)胞

H1299細(xì)胞供應(yīng)H1299細(xì)胞【高活性】現(xiàn)貨供應(yīng)
細(xì)胞相關(guān)知識(shí)
哺乳細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)方式有三種：貼壁培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、無血清懸浮培養(yǎng)。這三種方式均可用于細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)。細(xì)胞在無Ca2+或 含Ca2+培養(yǎng)基中可同樣生長(zhǎng)，也可生長(zhǎng)在血清濃度降低的培養(yǎng)基中,單層培養(yǎng)細(xì)胞在5-10％FBS-DMEM中能生長(zhǎng)很好。一般來講，1:10傳代后 ，一周可以長(zhǎng)滿。嚴(yán)禁過度生長(zhǎng)，這點(diǎn)很重要。因?yàn)闀?huì)導(dǎo)致細(xì)胞密度加大和堆積，影響病毒斑的形成和轉(zhuǎn)染，傳代時(shí)也不易打散。懸浮的 細(xì)胞很容易大規(guī)模培養(yǎng)，但不容易保持穩(wěn)定。細(xì)胞在傳代120次以后，其表型可能改變，生長(zhǎng)狀況不再*是單層的了，偶爾會(huì)形成局 部的細(xì)胞成團(tuán)聚集，應(yīng)立即拋棄，重新引入新傳代的細(xì)胞。


1、用大瓶培養(yǎng)較小瓶要好，可能是更有利于293均勻的分布，利于營(yíng)養(yǎng)的攝取
2、培養(yǎng)液要新鮮，每次只配1000ml，分為2-4瓶，不用的培養(yǎng)液，凍存在-20度
3、要及時(shí)傳代，是細(xì)胞基本鋪滿培養(yǎng)瓶底部，但是細(xì)胞之間還沒有*貼緊，總是多少有空隙的時(shí)候。
4、如果細(xì)胞貼壁不好，可能是消化過久，或是培養(yǎng)瓶不夠干凈，當(dāng)然要除外細(xì)胞污染。
5、如果使用用玻璃培養(yǎng)瓶或皿，可以采用高壓滅菌的0.2%明膠溶液預(yù)處理培養(yǎng)/培養(yǎng)皿，方法是將明膠加入培養(yǎng)皿，使之浸泡到底面的各 個(gè)部分，然后吸出，置超凈臺(tái)內(nèi)晾干即可使用。這樣處理后細(xì)胞貼壁效果好且鏡下細(xì)胞立體感強(qiáng)。如果是新的塑料培養(yǎng)瓶就不用處理。

物種來源：
1.種屬：人（Human）
2.器官：胚腎（embryonic kidney）
3.類型：上皮細(xì)胞（epithelial）
培養(yǎng)條件：
1.基質(zhì)：MEM/DMEM培養(yǎng)基
2.血清：10%FBS
3.環(huán)境：37℃, 5% CO2
4.消化：0.25%
5.傳代：1：6~1：10傳代, 每周一次
6.換液：2~3天
7.凍存：*培養(yǎng)基+ 5% （v/v） DMSO
特別說明：細(xì)胞置室溫一段時(shí)間后會(huì)漂浮起來，要保證貼壁請(qǐng)盡可以讓細(xì)胞處于37℃環(huán)境。

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