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人肝癌細胞9204細胞深圳現貨供應

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所  在  地深圳市

更新時間:2016-07-07 16:41:43瀏覽次數:587次

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細胞名稱:肝癌細胞9204細胞深圳現貨供應

生長特性:貼壁生長
運輸方式:凍存細胞,快遞干冰運輸;復蘇之后,常溫下運輸。
細胞來源:ATCC來源,國家工程細胞研究中心。
包裝:培養(yǎng)瓶加說明書。
細胞凍存:液氮凍存。

肝癌細胞9204細胞深圳現貨供應細胞復蘇:
1、打開水浴鍋, 預熱到37度
2、從液氮罐中出凍存的細胞,迅速放入37度水浴鍋快速溶解
3、在超凈臺中,把溶解的細胞移入離心管,(離心管內先加入2ML左右的培養(yǎng)基).1000RPM 離心5分鐘
4、棄上清,加入1ML培養(yǎng)基,吹打均勻,移入培養(yǎng)瓶內,(培養(yǎng)瓶內先加入4-5ML培養(yǎng)基),37度過5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)
5、第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
肝癌細胞9204細胞深圳現貨供應細胞傳代:
1、當細胞融合度達到90%以上時,給細胞傳代;
2、37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
3、在超凈臺中,棄培養(yǎng)基,加入2-5mlPBS清洗細胞后,再加入1ml胰酶消化細胞;
4、顯微鏡下觀察到細胞變圓,有細胞開始脫離瓶壁時,加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
5、用移液器輕輕吹下瓶壁上剩余的細胞,并輕輕吹打將細胞吹散;
6、將細胞移入離心管中,1000rpm離心5min;
7、棄上清,加入15-20ml的培養(yǎng)基(含血清)重懸細胞后轉入T75培養(yǎng)瓶中或按適當比例傳到T25瓶中(確保細胞貼壁后融合度在25-50%之間),細胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混勻細胞懸液,確保細胞均勻分布;
8、將培養(yǎng)瓶置于37°C,5% CO2的無菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞凍存:
1、將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2、準備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現用現配) 或95%FBS+5%DMSO(現用現配)
3、加1.5毫升凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘.  放入-20度冰箱1-3小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
4、原則:慢凍速溶
5、加1.5毫升凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內

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