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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間：2018-06-08 15:36:39瀏覽次數(shù)：499次
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RNase抑制劑（人源）本品是從細菌中分離的重組人RNase Inhibitor，其分子量為50 KD，能通過與RNase A 1:1形成非共價的復合體而抑制后者的活性。本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì)，與其它競爭性抑制劑（核酸類、無機磷酸類）不同，可以很容易地通過苯酚處理將其從反應體系中除去。
1. 抑制范圍廣，可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性，但不能抑制RNase T1
RNase抑制劑（人源）
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
RNase抑制劑（人源） | 2500 U | 490元 |
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本品是從細菌中分離的重組人RNase Inhibitor，其分子量為50 KD，能通過與RNase A 1:1形成非共價的復合體而抑制后者的活性。本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì)，與其它競爭性抑制劑（核酸類、無機磷酸類）不同，可以很容易地通過苯酚處理將其從反應體系中除去。
1. 抑制范圍廣，可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性，但不能抑制RNase T1、RNase H、S1 RNase和Aspergillus RNase的活性。
2. 與SP6、T3和T7 RNA polymerase、AMV和MMLV逆轉錄酶、Taq DNA聚合酶等兼容。
3. 在廣泛的pH范圍（pH 5-8）有活性。
4. 應用范圍廣，可以用于RT-PCR、cDNA合成、in vitro transcription or translation等需要抑制RNase活性的酶反應中。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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