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RNase抑制劑（小鼠源）

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更新時間：2018-06-08 15:40:18瀏覽次數(shù)：316次

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產(chǎn)品簡介

RNase抑制劑（小鼠源）本RNase 抑制劑是鼠源重組蛋白，分子量為 50 kDa，可以特異性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它與 RNase 以 1:1 的比例高效非共價結(jié)合從而抑制其活性。但對 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNaseH 或來源于曲霉屬的 RNase 無效。此外，與下列聚合酶共同使用時，該抑制劑不會抑制聚合酶的活性，如：Taq DNA 聚合酶、AMV

詳細介紹

RNase抑制劑（小鼠源）

名稱	規(guī)格	價格	手冊
RNase抑制劑（小鼠源）	3000U	990元

本RNase 抑制劑是鼠源重組蛋白，分子量為 50 kDa，可以特異性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它與 RNase 以 1:1 的比例高效非共價結(jié)合從而抑制其活性。但對 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNaseH 或來源于曲霉屬的 RNase 無效。此外，與下列聚合酶共同使用時，該抑制劑不會抑制聚合酶的活性，如：Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反轉(zhuǎn)錄酶或噬菌體 RNA 聚合酶 (SP6、T7 或 T3) 。
重組小鼠 RNase 抑制劑不含有半胱氨酸，已證實，人源中的半胱氨酸能導(dǎo)致抑制劑對氧化敏感甚至失活。因此，小鼠 RNase 抑制劑與人/豬 RNase 抑制劑相比，抗氧化能力顯著提高，且在 DTT 濃度較低 (< 1 mM) 時更穩(wěn)定。這使其在不適宜高濃度 DTT的反應(yīng)中更具優(yōu)勢，如實時 RT-PCR。
本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 抑制常見真核 RNase
2. 與 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反轉(zhuǎn)錄酶兼容
3. 在較寬的 pH 范圍內(nèi)均有活性 (pH 5-8)
4. cDNA 合成和 RT-PCR
5. 體外轉(zhuǎn)錄/翻譯
6. 酶催化的 RNA 標記反應(yīng)
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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