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中草藥DNAout

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

中草藥DNAout基于PCR的中藥分子鑒定方法是辨別中藥真?zhèn)?，保證藥材質(zhì)量，促進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化的十分重要的手段。但由于日曬，高溫烘烤等處理極大地破壞了中藥材DNA的完整性；處理過程中多酚多糖及其氧化物也會(huì)與DNA發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)，所以從中藥材中提取可以用于PCR的DNA比從新鮮植物中提取要困難很多。為解決這一問題，LMAI Bio在植物DNAOUT產(chǎn)品基礎(chǔ)上開發(fā)了本產(chǎn)品。其特點(diǎn)如下：
1. 適合

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中草藥DNAout

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中草藥DNAout

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基于PCR的中藥分子鑒定方法是辨別中藥真?zhèn)?，保證藥材質(zhì)量，促進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化的十分重要的手段。但由于日曬，高溫烘烤等處理極大地破壞了中藥材DNA的完整性；處理過程中多酚多糖及其氧化物也會(huì)與DNA發(fā)生復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)，所以從中藥材中提取可以用于PCR的DNA比從新鮮植物中提取要困難很多。為解決這一問題，LMAI Bio在植物DNAOUT產(chǎn)品基礎(chǔ)上開發(fā)了本產(chǎn)品。其特點(diǎn)如下：
1. 適合于大多數(shù)藥材。
2. 得到的DNA純凈，OD260/280一般都在1.6以上，原液或100倍之內(nèi)的稀釋液一般都能直接作為PCR模板。
3. 操作簡(jiǎn)單，整個(gè)過程只需要三十分鐘左右。
4. 試劑無(wú)毒無(wú)害，環(huán)保衛(wèi)生。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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