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大提柱式真菌DNAout

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更新時(shí)間：2018-06-11 21:20:43瀏覽次數(shù)：287次

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產(chǎn)品簡介

大提柱式真菌DNAout本產(chǎn)品在LMAI Bio柱式真菌DNAOUT（CAT#:70901）基礎(chǔ)上改良而得的大提升級(jí)產(chǎn)品，主要用于大量快速從各種真菌材料中提取基因組DNA。跟柱式真菌DNAOUT相比，它具有下列特點(diǎn)：
1. 處理量大，一次可以處理1-3克各種真菌組織。
2. 純度高，OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制劑，得到的DNA可以不經(jīng)稀釋直接用于酶切、PCR、 real-ti

詳細(xì)介紹

 

大提柱式真菌DNAout

名稱

規(guī)格

價(jià)格

手冊(cè)

大提柱式真菌DNAout

4次

1090元

 

本產(chǎn)品在LMAI Bio柱式真菌DNAOUT（CAT#:70901）基礎(chǔ)上改良而得的大提升級(jí)產(chǎn)品，主要用于大量快速從各種真菌材料中提取基因組DNA。跟柱式真菌DNAOUT相比，它具有下列特點(diǎn)：
1. 處理量大，一次可以處理1-3克各種真菌組織。
2. 純度高，OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制劑，得到的DNA可以不經(jīng)稀釋直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting，microsalite analysis等各種后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
3. 產(chǎn)率一般在10-100 μg/g真菌樣品。離心吸附柱大吸附量為800 μg。
4. DN段長度一般在20-40 Kb左右。
5. 適用范圍廣，適用于絕大多數(shù)真菌材料，包括酵母（S. cerevisiae，S. pomb，Pichia pastoris）等。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
Lysis Buffer,pH8.0 
MABT Washing Solution,5X
Mac Ewen Solution 
Magnesium Acetate Solution（乙酸鎂溶液）,1M 
Magnesium Chloride Solution（化鎂溶液）,1M 
Magnesium Sulfate Solution（硫酸鎂溶液）,1M
Maleate Buffer（馬來酸緩沖液）,0.2M,pH5.0 


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