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更新時(shí)間：2018-06-11 14:45:53瀏覽次數(shù)：376次
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柱式動(dòng)物線粒體DNAout，測(cè)序級(jí)線粒體是非常重要的細(xì)胞器，它不但跟很多人類疾病相關(guān)，而且還是母系遺傳
研究的重要材料。對(duì)線粒體進(jìn)行遺傳研究和進(jìn)化研究都需要純化線粒體DNA。本產(chǎn)品
就是基于先純化動(dòng)物細(xì)胞線粒體、再從中柱式法純化其DNA的兩步法試劑盒。它具有
下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶不需要自己配制各種溶液，優(yōu)化各種條件。
柱式動(dòng)物線粒體DNAout，測(cè)序級(jí)
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
柱式動(dòng)物線粒體DNAout，測(cè)序級(jí) | 15次 | 1990元 |
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線粒體是非常重要的細(xì)胞器，它不但跟很多人類疾病相關(guān)，而且還是母系遺傳
研究的重要材料。對(duì)線粒體進(jìn)行遺傳研究和進(jìn)化研究都需要純化線粒體DNA。本產(chǎn)品
就是基于先純化動(dòng)物細(xì)胞線粒體、再從中柱式法純化其DNA的兩步法試劑盒。它具有
下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶不需要自己配制各種溶液，優(yōu)化各種條件。
2. 兩步法，先純化線粒體，再柱式法純化其中的DNA，有粗提（mtDNA純化前不用DNase處理線粒體）和精提（mtDNA純化前用DNase處理線粒體）兩套操作方案，適合于各種要求不同的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3. 本產(chǎn)品一，測(cè)序級(jí)次可以處理約107×108個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞，10 mg培養(yǎng)細(xì)胞（相當(dāng)于5瓶150 mm培養(yǎng)細(xì)胞）可以純化到到0.2-0.5 mg線粒體。
4. 本產(chǎn)品適用于各種懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞，不建議用于動(dòng)物實(shí)體組織。
5. 提供線粒體染液，可以在操作中隨時(shí)監(jiān)測(cè)純化過程中線粒體的完整性。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，，測(cè)序級(jí)離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
，測(cè)序級(jí)相關(guān)產(chǎn)品列表：
Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (reducing,6X)
Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (non reducing,4X)
Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X)
LDS-Sample Buffer (non-reducing,4X)
LDS-Sample Buffer (reducing,4X)
Leucine Solution（亮氨酸溶液）,0.3%
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