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天凈沙通用型MLPA試劑盒

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更新時間：2018-06-13 15:31:53瀏覽次數(shù)：477次

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  分子生物學(xué)

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產(chǎn)品簡介

天凈沙通用型MLPA試劑盒多重連接依賴探針擴(kuò)增（Multiplex ligation dependent probe amplication，MLPA），是一種高通量基因檢測技術(shù)，它能夠于單一反應(yīng)管內(nèi)同時檢測40多個不同的核苷酸序列的拷貝數(shù)變化。該技術(shù)已廣泛應(yīng)用于染色體異常、基因點突變、基因缺失、基因甲基化、癌癥及mRNA表達(dá)研究等醫(yī)學(xué)基因檢查領(lǐng)域。本公司MLPA試劑盒克服傳統(tǒng)長探針制備復(fù)雜、繁瑣

詳細(xì)介紹

天凈沙通用型MLPA試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
天凈沙通用型MLPA試劑盒	20次	詢價

多重連接依賴探針擴(kuò)增（Multiplex ligation dependent probe amplication，MLPA)，是一種高通量基因檢測技術(shù)，它能夠于單一反應(yīng)管內(nèi)同時檢測40多個不同的核苷酸序列的拷貝數(shù)變化。該技術(shù)已廣泛應(yīng)用于染色體異常、基因點突變、基因缺失、基因甲基化、癌癥及mRNA表達(dá)研究等醫(yī)學(xué)基因檢查領(lǐng)域。本公司MLPA試劑盒克服傳統(tǒng)長探針制備復(fù)雜、繁瑣的缺點，將長探針分為A段、B段兩部分，分別制備。長探針B段有引物結(jié)合區(qū)、長度填充區(qū)和PCR引物結(jié)合區(qū)組成，長探針A段（客戶合成）由基因?qū)Ｒ粎^(qū)和上游過橋引物識別區(qū)組成，客戶只需在合成探針時設(shè)計一段過橋引物識別區(qū)，即可實現(xiàn)快速、高通量基因檢測。該試劑盒具有下列特點：

1. 靈敏度高，特異性強(qiáng)，高通量檢測。

2. 精準(zhǔn)度高，重復(fù)性強(qiáng)，操作簡便，24小時出結(jié)果。

3. 低可檢測ng級DNA或RNA，可適用石蠟包埋和福爾馬林處理等樣品。

4. 應(yīng)用領(lǐng)域廣，可用于基因組拷貝數(shù)、染色體數(shù)目異常檢測；基因片段缺失與重排分析；腫瘤細(xì)胞檢測；基因表達(dá)檢測；DNA 甲基化、SNP分析等。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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