目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>蔗糖系列>> 蔗糖合成酶（分解方向 SSⅠ)測試盒微量法
| 貨號 | BK-01S6703 |
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商品介紹：
測定意義: 蔗糖是源（葉片等）光合產(chǎn)物向“庫"器官運輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶（Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13）是雙向反應(yīng)酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其分解方向SS-Ⅰ的活性對于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意義。 測定原理 SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游離果糖和UDPG，采用3,5－二硝基水楊酸法測定還原糖的含量來反映酶活性的高低。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰 |
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
蔗糖合成酶（分解方向 SSⅠ)測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6703 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
1瓶 C1.Ly1+2-/9細胞株 C1.Ly1+2-/9 低溫運輸和保存
50mL RIPA Buffer,5X RIPA Buffer,5X 常溫保存
1 管 DB3.1大腸桿菌 DB3.1 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pRetroX-IRES-ZsGreen1 pRetroX-IRES-ZsGreen1 低溫運輸，-20℃保存
副溶血性弧菌成套生化鑒定管（SN/T0173-2010) 16種*1套/盒*5盒
2 ug pcDNA3.1（+）/GFP pcDNA3.1（+）/GFP 低溫運輸，-20℃保存
營養(yǎng)鹽瓊脂 Nutrient agar 250g
100g 馬來酸 Maleic Acid 室溫密封保存
50T 諾沃克病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
1g 氯吡苯脲 Forchior Fennron 室溫保存
100mL Bicine Buffer，0.5M,pH8.5 Bicine Buffer，0.5M,pH8.5 常溫保存
蔗糖合成酶（分解方向 SSⅠ)測試盒微量法AKAP2 蛋白激A2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
CD329/SIGLEC8 CD329抗體 規(guī)格: 0.2ml
KCNE1 鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 規(guī)格: 0.2ml
DYDC1 DYDC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Lamin A/C(Ser22) 磷酸化核纖層蛋白A/C抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Dab1 (Tyr220) 磷酸化Disabled 1抗體 規(guī)格: 0.1ml
ACTH (18-39) 促上皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-CHEK1 (Ser296) 磷酸化細胞周期檢測點激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD336/NKp44/NCR2 細胞毒性受體NK-p44抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
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