Amplite 熒光法丙三醇檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測丙三醇的試劑盒，甘油是合成肝臟和脂肪組織中甘油三酯和磷脂的前體。禁食時，儲存在這些脂滴中的甘油三酯可被水解以產生游離甘油和脂肪酸。 釋放到血流中的游離甘油的量與甘油三酯/脂肪酸循環(huán)速率成正比，甘油三酯/脂肪酸循環(huán)速率在代謝調節(jié)和熱量產生中是重要的。 Amplite 熒光甘油測定試劑盒提供了一種靈敏的基于熒光的測定方法，用于測量生物樣品中的甘油水平。 該測定基于甘油的酶偶聯(lián)反應，其中產物過氧化氫可以在HRP偶聯(lián)反應中使用我們的Amplite HRP底物檢測。 熒光信號可以通過Ex / Em = 540 / 590nm處的熒光酶標儀進行測量。 使用此熒光甘油測定試劑盒，我們能夠在100μL反應體積中檢測到低至0.015 mg / L（?0.16μM）的甘油。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質的Amplite 熒光法丙三醇檢測試劑盒。

樣品實驗方案

簡要概述

1.準備甘油工作溶液（50 µL）
2.加入甘油標準品或測試樣品（50 µL）
3.在室溫下孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的熒光增加

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環(huán)。
1.1 Amplite HRP底物儲備液（200X）：
將50 µL DMSO（組分E）添加到Amplite HRP底物（組分A）的小瓶中，制成200X Amplite HRP底物原液,避光。

1.2 甘油標準溶液（1 mg / mL）：
將1 mL ddH2O或1x PBS緩沖液添加到小瓶甘油標準溶液（組分D）中，制成1 mg / mL甘油標準溶液。

2.標準溶液

甘油標準
將10μL的1 mg / mL甘油標準溶液添加到990μL的1x PBS緩沖液中，以生成10μg/ mL的甘油標準溶液（GS7）。取10 µg / mL甘油標準溶液（GS7），并在1x PBS緩沖液中進行1：3系列稀釋，以得到系列稀釋的甘油標準液（GS6-GS1）。

3.工作溶液

3.1 將5 mL測定緩沖液（組分C）加入一瓶酶混合物（組分B）中，并混合均勻。

3.2 將25 µL 200X Amplite HRP底物原液添加到組分B + C的瓶子中，并充分混合以制成甘油工作液。 注意：這種甘油工作溶液足以用于一個96孔板。 它不穩(wěn)定，請及時使用。