簡要概述

1. 在96孔板中制備細(xì)胞（100 µL /孔）

2. 每空加入10ul WST-8TM溶液

3. 在37°C孵育1-4小時

4. 監(jiān)測OD = 460 nm處的吸光度

如果將WST-8TM溶液保存在4°C并避光，其穩(wěn)定性可超過一年。 將其存放在<-20°C的溫度下以便更長的存儲時間。

操作步驟

細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測

1. 在具有透明底部的組織培養(yǎng)微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞（5000到10,000個細(xì)胞/孔板）。

2. 將測試化合物添加到細(xì)胞中，并在37°C，5％CO2的培養(yǎng)箱中孵育，所需的時間根據(jù)具體實驗而定（例如24、48或96小時）。 對于空白孔（不含細(xì)胞的培養(yǎng)基），添加相同量的測試化合物。 對于96孔板，建議的總體積為100 µL，對于384孔板，建議的總體積為50 µL。 注意：應(yīng)單獨評估每種細(xì)胞系，以確定增殖或細(xì)胞毒性誘導(dǎo)的細(xì)胞密度。 對于增殖測定，使用較少的細(xì)胞； 對于細(xì)胞毒性測定，請使用更多的細(xì)胞。

3. 向每個孔中加入10 µL /孔（96孔板）或5 µL /孔（384孔板）的WST-8TM溶液。

4. 將板在37°C下孵育1-4小時，避光。 注意：孵育時間可能從30分鐘到過夜，具體取決于所用的單個細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。 優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

5. 用吸光度板酶標(biāo)儀在OD = 460 nm處監(jiān)測吸光度的增加。

細(xì)胞計數(shù)檢測

1. 在具有透明底部的組織培養(yǎng)微孔板中準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)物。 對于96孔板，建議的總體積為100 µL；對于384孔板，建議的總體積為50 µL。 注意：我們在透明的底部96孔板中使用了連續(xù)稀釋的HeLa和Jurkat細(xì)胞懸浮液進(jìn)行測定。

2. 向每個孔中加入10 µL /孔（96孔板）或5 µL /孔（384孔板）的WST-8TM溶液。

3. 將板在37°C下孵育1-4小時，避光。 注意：孵育時間可能從30分鐘到過夜，具體取決于所用的單個細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。 優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

4. 使用吸光度板讀數(shù)器在OD = 460 nm處監(jiān)測吸光度的增加。