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上海江萊生物科技有限公司

小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒使用說明書

時(shí)間:2012-9-18閱讀:196
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小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒使用說明書

Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1

酶標(biāo)試劑:3 ml×1瓶(48/6 ml×1瓶(96

小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒】本試劑僅供研究使用 

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

試劑盒組成

封板膜:2片(48/2片(96

說明書:1

密封袋:1個(gè)

標(biāo)準(zhǔn)品:   2700ng/L 0.5ml×1 0.5ml×1瓶  2-8℃保存

酶標(biāo)包被板:  1×48     1×96         2-8℃保存

樣品稀釋液: 3ml×1瓶  6 ml×1     2-8℃保存

顯色劑A: 3ml×1 6 ml×1     2-8℃保存

顯色劑B: 3ml×1 6 ml×1     2-8℃保存

終止液:     3ml×1 6ml×1     2-8℃保存

濃縮洗滌液:20ml×20倍)×1 20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘

4. 配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

上海江萊生物科技有限公司擁有高品質(zhì)的國內(nèi)生命科學(xué),具有種類多、質(zhì)量好、價(jià)格低等優(yōu)點(diǎn)。質(zhì)量被全國各大院??蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可,并為Elisa試劑盒長期供應(yīng)商,作為戰(zhàn)略合作伙伴。歡迎您訂購!

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