本試劑盒采用酶聯(lián)免疫方法（ELISA）檢測犬血清中的特異性抗狂犬病毒抗體，用于犬只免疫后抗體監(jiān)測。
【試劑組成】
| 1.預包被板 | 48T/96T; | | 8. 終止液（6號液） | 1支; |
| 2.酶結(jié)合物原液 | 2支; | | 9. 臨界對照品 | 1支; |
| 3.酶結(jié)合物稀釋液 | 2支; | | 10.陰性對照品 | 1支; |
| 4.洗滌液（PBST干粉） | 1/2包; | | 10.不干膠膜 | 1/2片; |
| 5.底物（3號液） | 1支; | | 11.自封袋 | 1個; |
| 6.顯色液（4號液） | 1支; | | 12.使用說明書 | 1份; |
| 7.*（5號液） | 1支; | | | |
【操作程序】
1. 酶結(jié)合物工作液配制：取1支酶結(jié)合物原液全部加入到1支酶結(jié)合物稀釋液中，充分混勻即可使用。
2. 洗滌液配制：每袋PBST干粉用蒸餾水500ml溶解混勻，即為洗滌液。
3. 加樣反應：每孔滴加樣品稀釋液2滴，加待檢樣品各5ul。每次試驗需設陰性對照、臨界對照各2孔，空白孔1孔（陰性對照、臨界對照已稀釋，試驗時可直接取100ul加入孔內(nèi)，空白孔僅加2滴樣品稀釋液）。放置37℃20分鐘。傾去孔內(nèi)液體，將已配制好的洗滌液加滿每孔并靜置30秒鐘，傾去，甩干；共洗滌5次，拍干。
4. 加酶反應：除空白對照孔外，其余每孔加已稀釋的酶結(jié)合物2滴，置37℃ 20分鐘。然后如上洗滌。
5. 顯色反應：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）1滴，混勻，終止反應后判讀結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
以空白對照調(diào)零，用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。A值≥臨界對照均值為陽性，說明待檢樣品的抗體濃度≥0.5IU/ ml；低于者說明待檢樣品的抗體濃度<0.5IU/ml。。
【注意事項】
1.試劑盒于2-8℃保存，有效期6個月。每次使用前應先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應密封保存。已稀釋的酶結(jié)合物工作液應盡快使用。
3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。
6. 37℃孵育時，建議使用水浴箱。如無條件，可在溫箱中放置濕盒進行反應并同時用不干膠膜封蓋板孔。
特別提示：在使用酶結(jié)合物工作液之前，應確保酶結(jié)合物原液已加入酶結(jié)合物稀釋液中并混勻！請在工作液瓶簽上注明配置時間。
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