固體和半固體樣品：稱取25 g樣品至盛有225mL滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖，即為1:10稀釋液?；蚍湃胧⒂?25 mL無菌蒸餾水的均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器(不推薦使用刀片式均質(zhì)器)拍打2min，制成1:10的樣品勻液。

，制成1:10的樣品勻液。

液體樣品：取25mL樣品至盛有225 mL無菌蒸餾水的錐形瓶（可在瓶內(nèi)預(yù)臵適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1:10的樣品勻液。

取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無菌水的試管中, 另換一支1mL無菌吸管反復(fù)吹吸,此液為1:100稀釋液。

樣品的稀釋不推薦使用刀片式均質(zhì)器

原標(biāo)準(zhǔn)為“反復(fù)吹吸50次”(原標(biāo)準(zhǔn)為“反復(fù)吹吸50次”)?？墒褂娩鰷u混勻器。可使用漩渦混勻器拍擊式均質(zhì)器

取1mL1:10稀釋液注入含有9mL無菌水的試管中, 另換一支1mL無菌吸管反復(fù)吹吸原標(biāo)準(zhǔn)為“反復(fù)吹吸5次”,此液為1:100稀釋液。

制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1 mL無菌吸管。5.1.5根據(jù)對樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2個(gè)～3個(gè)(原標(biāo)準(zhǔn)為“3個(gè)”) （液體樣品可包括原液）在進(jìn)行10倍遞增稀釋的同時(shí)，每個(gè)稀釋度分別吸取1 mL樣品勻液于2個(gè)無菌平皿內(nèi)。同時(shí)分別取1 mL稀釋液加入2個(gè)無菌平皿作空白對照。

及時(shí)將15mL～20 mL冷卻至46℃的馬鈴薯-葡萄糖瓊脂或孟加拉紅培養(yǎng)基(可放置46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。