一、概述

    抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)是一切免疫測(cè)定技術(shù)的zui基本原理。在此基礎(chǔ)上結(jié)合一些生化或理化方法作為信號(hào)顯示或放大系統(tǒng)即可建立免疫測(cè)定法，如放射免疫測(cè)定法、酶免疫測(cè)定法、熒光免疫測(cè)定法等。一個(gè)成功的免疫測(cè)定法必須具備3個(gè)要素：性能優(yōu)良的抗體、靈敏和專一性的標(biāo)記物和的分離手段。按照是否使用標(biāo)記物分為標(biāo)記免疫測(cè)定法和非標(biāo)記免疫測(cè)定法，后者又稱為經(jīng)典免疫測(cè)定法；按反應(yīng)介質(zhì)分為均相或非均相(免疫復(fù)合物需分離后檢測(cè))免疫測(cè)定法；按反應(yīng)狀態(tài)分為平衡態(tài)或非平衡態(tài)免疫測(cè)定法。按照標(biāo)記物種類，標(biāo)記免疫測(cè)定法又分為放射性標(biāo)記測(cè)定法和非放射性標(biāo)記測(cè)定法。

目前zui常用的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)如下：

（1）放射免疫測(cè)定技術(shù)  

（2）酶免疫測(cè)定技術(shù)

（3）熒光免疫測(cè)定技術(shù)

（4）發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù)

（5）膠體金免疫測(cè)定技術(shù)

二、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)

（一）ELISA的基本原理

 ELISA(Enzyme-Linked immunosorbent assay)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。這一方法的基本原理如下。

 （1）使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，井保持其免疫活性；

 （2）使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性．又保留酶的活性。

（二）ELISA的類型

 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型。

1 雙抗體夾心法測(cè)抗原

2 雙抗原夾心法測(cè)抗體

3 間接法測(cè)抗體

4 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體

5 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原

（三）ELISA的材料與試劑

 完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；酶的底物；陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；洗滌液；酶反應(yīng)終止液。

1 免疫吸附劑 

2 結(jié)合物 

3 酶的底物

4 洗滌液

5 酶反應(yīng)終止液

6 陽性對(duì)照品和陰性對(duì)照品

7 參考標(biāo)準(zhǔn)品

三、*的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)

（一）人工*抗原的合成

（二）合成抗原的鑒定

（三）抗體的制備與純化

（四）標(biāo)準(zhǔn)競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線的制作

（五）畜產(chǎn)品中SM2殘留的ELISA檢測(cè)

（六）方法評(píng)價(jià)

1  特異性

2  靈敏度

3  準(zhǔn)確度

4  度