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PCR法DNA探針標記試劑盒原理及特點:
PCR標記的原理是用帶標記的dNTP進行PCR,zui后得到的PCR產(chǎn)物將帶有標記,可以直接用于雜交試驗。其原理示意圖如下:
PCR法制備DNA探針示意圖
本產(chǎn)品是在上述原理的基礎(chǔ)上開發(fā),它具有下列特點:
1. 一站式,本試劑盒提供經(jīng)過優(yōu)化的試劑,不需要用戶自己摸索。
2. 足夠10次50 uL體系的常規(guī)PCR(用于制備標記反應(yīng)的模板和設(shè)置對照反應(yīng))和5次50 uL體系的標記反應(yīng)。
3. 一次標記可以得到ug級的雙鏈DNA探針或約700ng的單鏈DNA探針,足夠多次雜交實驗用。
4. 既可用于制備雙鏈探針,也可以用于單鏈探針。
5. 90604A需自備含標記核苷酸的dNTP, 90604B和90604C分別含*和地高辛標記的底物。自備的標記包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本產(chǎn)品得到的探針參入率一般為4-5%(每100個核苷酸中有4-5個將帶有非同位素標記),有效降低了空間阻礙,檢測效果*。
7. 可以用于Southern 和Northern Blot、原位雜交、菌落和斑點印跡雜交等分析。
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