一、產(chǎn)品介紹:
BioTNT qPCR Array專為檢測不同組織或細胞中特定基因的表達量而設(shè)計,這些基因按照預(yù)制或定制要求成套設(shè)置。檢測結(jié)果所顯示的表達差異可幫助研究者鑒定或驗證這些基因的生物學意義,以及與其研究的重要相關(guān)性。
對于目錄(預(yù)制)產(chǎn)品,每塊384孔板包含84對PCR引物,可以進行4個樣本單孔或者兩個樣本雙復(fù)的實驗。這些引物全部經(jīng)過預(yù)先驗證,并包被于的板孔中。在同一塊96孔板上,有12個(384孔板有48個)反應(yīng)孔包被了不同類型的對照,用以檢測從反轉(zhuǎn)錄到qPCR整個過程的反應(yīng)效率。
逆轉(zhuǎn)錄試劑和以熒光染料SYBR®Green 為基礎(chǔ)的定量檢測試劑作為被*的RT-qPCR試劑產(chǎn)品可與qPCR Array配套使用。該系列試劑均經(jīng)過優(yōu)化,具有高的靈敏度、效率和特異性。其他公司的類似試劑可能適用,但未驗證過,不*使用。
二、產(chǎn)品優(yōu)勢
靈敏度高,樣本使用量低
線性范圍廣,可同時檢測表達水平差異大的基因
每個基因的檢測引物優(yōu)化后保證高擴增率和產(chǎn)物單一
重復(fù)性高,Ct值的平均差異只有0.25個循環(huán)
覆蓋范圍廣:目錄產(chǎn)品包含通路分析、疾病研究
定制產(chǎn)品可根據(jù)客戶要求選擇設(shè)置
數(shù)據(jù)分析方便:軟件方便數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
三.運輸和儲存條件:
-20℃儲存
四.適用儀器:
plate format | Instrument provider | QPCR instrument model |
384well | lifetechnologies | 7900,ViiA7(384 well block) |
96 well | lifetechnologies | 7300,7500,7700,7900(standard 96well),ViiA7(standard 96well) |
96 well | lifetechnologies | 7500(fast block),7900HT(fast block),stepone plus,ViiA 7(Fast block) |
96 well | Biorad | iCycler,MyiQ, iQ5 |
96 well | Biorad | CFX96,DNA Engine opticon,opticon 2,Chromo4 |
五.質(zhì)量標準(QC)
1. biotnt gene qPCR array中檢測的基因引物,經(jīng)實驗驗證結(jié)果分析,融解曲線均呈單一銳鋒,電泳條帶均呈單一條帶,說明這些引物均是特異擴增引物,驗證合格。
2. PTC(陽性對照)反應(yīng)孔,從融解曲線上分析均呈單一銳鋒,從擴增曲線上分析,CT值介于18~22之間。
3. RTC(spike-in反轉(zhuǎn)錄對照)反應(yīng)孔,從融解曲線上分析均呈單一銳鋒,從擴增曲線上分析,CT值介于17~23之間。
4. HGDC 的CT 值應(yīng)大于35,說明樣本中沒有基因組污染。
5. RTC和 PTC的三重復(fù)CT 值應(yīng)比較接近,說明實驗重復(fù)性好。
6. 板與板之間(批內(nèi))重復(fù)性達0.99以上,具有高度重復(fù)性。
六.基因(引物)排布 :
每一個樣本區(qū)里的基因排列如下:
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 |
A | 基因1 | 基因2 | 基因3 | 基因4 | 基因5 | 基因6 | 基因7 | 基因8 | 基因9 | 基因10 | 基因11 | 基因12 |
B | 基因13 | 基因14 | 基因15 | 基因16 | 基因17 | 基因18 | 基因19 | 基因20 | 基因21 | 基因22 | 基因23 | 基因24 |
C | 基因25 | 基因26 | 基因27 | 基因28 | 基因29 | 基因30 | 基因31 | 基因32 | 基因33 | 基因34 | 基因35 | 基因36 |
D | 基因37 | 基因38 | 基因39 | 基因40 | 基因41 | 基因42 | 基因43 | 基因44 | 基因45 | 基因46 | 基因47 | 基因48 |
E | 基因49 | 基因50 | 基因51 | 基因52 | 基因53 | 基因54 | 基因55 | 基因56 | 基因57 | 基因58 | 基因59 | 基因60 |
F | 基因61 | 基因62 | 基因63 | 基因64 | 基因65 | 基因66 | 基因67 | 基因68 | 基因69 | 基因70 | 基因71 | 基因72 |
G | 基因73 | 基因74 | 基因75 | 基因76 | 基因77 | 基因78 | 基因79 | 基因80 | 基因81 | 基因82 | 基因83 | 基因84 |
H | HK1 | HK2 | HK3 | HGDC | HGDC | HGDC | RTC | RTC | RTC | PTC | PTC | PTC |
& 基因引物:84個反應(yīng)孔(從A排到G排)已預(yù)先交聯(lián)好特異基因引物(詳見基因引物列表)。
& HK1-3:3條已交聯(lián)的管家基因(內(nèi)參)引物,可作為array數(shù)據(jù)標準化過程中樣品的陽性對照。
&HGDC:基因組DNA對照,可用于qPCR反應(yīng)體系中是否有基因組DNA污染。
& RTC:spike-in反轉(zhuǎn)錄對照,可用于檢測RT反應(yīng)的效率。這些已交聯(lián)的引物可特異性擴增樣品中外源性spike-in RNA反轉(zhuǎn)錄形成的cDNA模板。
& PTC:陽性PCR對照,已交聯(lián)DNA陽性質(zhì)粒模板,主要用于實時監(jiān)測array反應(yīng)板的PCR擴增效率。
*:
Human Signal Transduction PathwayFinder PCR Array,人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路finder PCR array:HU-STPF-084
Mouse Signal Transduction PathwayFinder PCR Array, 小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路finder PCR array, 貨號:MS-STPF-084
Rat Signal Transduction PathwayFinder PCR Array大鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路finder PCR array 貨號:RA-STPF-084):
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路finder PCR array簡介:
這個芯片匯集了10個常用的信號通路的關(guān)鍵基因,包括TGFß Pathway,WNT Pathway,NFκB Pathway,JAK/STAT Pathway,p53 Pathway,Notch Pathway,Hedgehog Pathway,PPAR Pathway,Hedgehog Pathway ,Hypoxia Pathway;可以從中篩選到起作用的信號通路,觀察在這些通路上基因是否激活或者受到抑制。QPCR array 提供了您一個非??尚挪⑶胰菀追治龅膶嶒灧椒?。
您可以采用本預(yù)制信號通路PCR array, 也可以從中間挑選部分通路或者部分基因,進行信號通路的定制。