人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒產(chǎn)品基本介紹:
產(chǎn)品類型:ELISA試劑盒
:135 64515386
大?。?/span>96T/48t
種類:鼠
目標(biāo)名稱:甲狀腺激素反應(yīng)(SPOT14同源,大鼠)
縮寫:THRSP
蛋白質(zhì)生物過程:合成/代謝
蛋白質(zhì)生物過程:脂肪合成和脂肪代謝
蛋白質(zhì)生物過程:脂質(zhì)的合成
檢測時間:1-5H
樣品體積:50-100ul
檢測wavelengt:450nm處
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒說明書:
原理:
此法采用定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)??贵w具體為THRSP已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何的THRSP目前的固定抗體的約束。*共軛的抗體特異性THRSP除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后,加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過氧化物酶(HRP)的洗滌后,加入到孔中。經(jīng)過洗滌,以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑,底物溶液加入到孔中,并顯色成比例的量的初始步驟中的約束的THRSP。彩色顯影被停止并測量的顏色的強(qiáng)度。
Specificty:
此法具有靈敏度高,特異性好,檢測大鼠THRSP。無顯著的交叉反應(yīng)性或大鼠的T??HRSP和類似物之間的干擾進(jìn)行了觀察。
精度:
批內(nèi)精密度(內(nèi)檢測精度):CV%<8%
三種已知濃度的樣品進(jìn)行了測試20次在一個平板上進(jìn)行評估。
間精密度(精密檢測間):CV%<10%
已知的三個樣本20檢測到的濃度進(jìn)行了測試評估。
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒樣品采集和存儲:
血清:使用血清分離管(SST)和全血標(biāo)本在室溫下兩小時或4℃過夜℃,然后離心15分鐘,在1000×g下。刪除上清即可檢測,或分裝和店內(nèi)樣品在-20°C或-80°C。但應(yīng)避免反復(fù)凍融循環(huán)。
等離子:采集血漿中EDTA或肝素作為抗凝血劑。在2-8°C在30分鐘內(nèi)收集離心15分鐘,1000×G。即可檢測,或分裝保存樣本在-20°C或-80°C。但應(yīng)避免反復(fù)凍融循環(huán)。
檢測程序:
在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測定前。據(jù)建議,所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測定一式兩份。
1。準(zhǔn)備好所有試劑,工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
2。請確定井?dāng)?shù)的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表
。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時,在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測。
4。每孔中取出的液體,不洗。
5。向每孔中加入100μl*抗體(1倍)。蓋上一個新的膠粘帶。孵育1小時,在37℃下(*抗體(1X)可能會出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,輕輕混勻,直到出現(xiàn)均勻解決方案。)
6。吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對干凈的紙巾。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個新的粘接劑條。溫育1小時,在37℃下
8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,在步驟6的5倍。
9。將90μlTMB底物添加到每個孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光
10。一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動酶標(biāo)板,以確保充分混合。
11。在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,使用酶標(biāo)儀測定各孔的光密度。如果波長校正,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,可能會比較高,不太準(zhǔn)確。
計(jì)算結(jié)果:
建議使用專業(yè)的軟“曲線專家1.3”的標(biāo)準(zhǔn)曲線,這可以從我們的下載。
平均每個標(biāo)準(zhǔn)和樣品的重復(fù)讀數(shù)和平均減去零標(biāo)準(zhǔn)的光學(xué)密度。
標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過減少使用能產(chǎn)生四參數(shù)邏輯(4-PL)的曲線擬合的計(jì)算機(jī)軟件的數(shù)據(jù)。作為一種替代方法,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,對在y-軸的濃度通過繪制在x-軸為每個標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度,并繪制一個通過在曲線圖上的點(diǎn)的擬合曲線。該數(shù)據(jù)可以通過繪制的的THRSP濃度與日志的OD的日志,并可以通過回歸分析確定的擬合線線性化。此過程會產(chǎn)生足夠的,但不太精確的適合的數(shù)據(jù)。
如果已稀釋的樣品,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出的濃度必須乘以稀釋因子。
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒 其他產(chǎn)品:
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兔鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)Elisa試劑盒 ,英文名: eosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit ,規(guī)格: 96T/48T 秦老師 蘇州科技大學(xué)
兔CD30分子(CD30)Elisa試劑盒 ,英文名: Clusterofdifferentiation30,CD30ELISAKit ,規(guī)格: 96T/48T 李 深圳森科技有限公司
一、服務(wù)
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
二、ELISA檢測概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
三、技術(shù)流程
雙抗體夾心法(檢測未知抗原) | 間接法(檢測未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 |
四、客戶須知
1、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等);
2、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標(biāo)號后,置-20℃或-70℃保存;
3、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測指標(biāo)及其他特殊要求。
五、報告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)
1、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線;
2、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟;
3、完整的實(shí)驗(yàn)報告(試劑耗材,實(shí)驗(yàn)方法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說明);
4、實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段,我公司客服人員會及時向您匯報實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。