白介素試劑盒
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組IL-13濃度
白介素試劑盒檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗抗體包被IL于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的IL會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-13抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??笽L抗體與結(jié)合在包被抗體上的IL結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,IL濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中IL的濃度。
反應(yīng)類型 夾心法
規(guī)格 96T
反應(yīng)時(shí)間 3.5h
檢測方法 Colormetric
樣本體積 100μL
樣本類型 血清,血漿或其他生物體液
圖1. 雙抗體夾心ELISA原理圖。
一個(gè)包裝的本試劑盒,包括標(biāo)準(zhǔn)品檢測,可以進(jìn)行96次檢測。
特異性
可檢測樣本中的IL,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
1000 | 2.406 2.434 | 2.42 | 2.335 |
500 | 1.605 1.659 | 1.632 | 1.547 |
250 | 0.966 0.954 | 0.96 | 0.875 |
125 | 0.458 0.464 | 0.461 | 0.376 |
62.5 | 0.288 0.26 | 0.274 | 0.189 |
31.25 | 0.19 0.182 | 0.186 | 0.101 |
15.63 | 0.134 0.14 | 0.137 | 0.052 |
0 | 0.078 0.092 | 0.08500000000000001 | -- |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。