細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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產(chǎn)品名稱 | 人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 |
英文名稱 | PC-3M-1E8 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sfTIBA2,3,5-三代本酸5克CP,99%
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-(4-叔丁基苯)-5-(... 2-(4-tert-Butylphenyl)-5-(4-biphenylyl... 15082-28-7 5G 通用試劑
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN務(wù)二晴punum>98% Glutcronitnilq 244-13-8
F2-2細(xì)胞,5-8轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠色素瘤細(xì)胞,B16BL6細(xì)胞 CM-H047人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLTOTALPROTEINCELLLYSISBUFFER總蛋白細(xì)胞裂解緩沖液蛋白組學(xué)級透明無色液體COLDsigma
NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21343-88-0硅酸載體 silicate
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T6細(xì)胞 ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)三亞乙基硫代1酰胺Triethylenethiophosphoramide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03普拉克索堿Pramipexole Base質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
CD4 Others Mouse 小鼠 CD4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 普拉克索堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Pramipexole Base質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1染料木素/金雀異黃酮Genistein質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 染料木素/金雀異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Genistein質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞幼蚊細(xì)胞;C6/36 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤,PC-12細(xì)胞 HeLa 229(細(xì)胞)L-異亮氨酸叔丁酯鹽酸鹽L-Isoleucine t-butyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2L-谷氨酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 谷胱甘肽(還原型)Glutathione (Reduced);GSH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)L-谷胱甘肽(標(biāo)準(zhǔn)品)Glutathione (Reduced)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,還原型
F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 谷胱甘肽(氧化型)Glutathione(Oxidized)質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。公司產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床